抗海蛇毒血清的研究现状
摘要:海蛇咬伤是我国东南沿海地区最严重的一种海洋生物伤。海蛇为爬行纲蛇目海蛇科的一类毒蛇,世界上现有记录的海蛇分为 2 亚科 16 属约 50 种,主要分布于太平洋及印度洋热带与亚热带的暖水海域。我国记录的有 10 属 16 种,分布于辽宁、山东、江苏、浙江、台湾、福建、广东、广西、海南诸省区的海区[1]。我国每年被毒蛇咬伤的人数大约在一万左右,但我国生产成型的抗蛇毒血清只有五步、蝮蛇、眼镜和银环蛇四种,但还没有有关海蛇的抗蛇毒血清的成型药品。鉴于国内外海蛇伤咬伤而无海蛇抗蛇毒血清的实用药品,制备海蛇抗蛇毒血清具有一定的现实研究制备的价值和意义。通过不断优化的现有工艺流程,探索研发更广谱、更有效、更安全和不良作用更小的抗蛇毒药物新途径将是未来蛇伤治疗新药发展的重要方向之一。
关键词:海蛇1; 蛇毒2; 抗血清3;效价4
蛇毒是由位于毒蛇头部两侧,眼后方藏于颌肌肉中的特异性腺体分泌的由蛋白质、肽类、碳水化合物、脂类、核苷、氨基酸和生物胺类等多种组分构成的混合物[1],其主要成份为蛋白质,约占干重的 90-95%,一般蛇毒含有 20 多种蛋白质,主要为酶类和毒素,成分十分复杂。正常贮存于毒腺的腺腔中,当毒蛇咬物时,在有关肌群的收缩掠挤压下,经过导管由毒牙注入猎物的体内,使猎物中毒死亡,并在吞食以后帮助消化。因此,蛇毒是毒蛇用于消化食物的,也是蛇用于防天敌的一种化学武器。新鲜的蛇毒为粘稠液体,微酸性或中性。经过真空干燥或冷冻干燥处理的蛇毒可于室温下保存 20-30 年。毒蛇毒素被分为若干个蛋白家族,包括酶类(丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、L-氨基酸氧化酶、磷脂酶 A2 等)和非酶类组分(去整合素、C 型凝集素、三指毒素、缓激肽增强肽、ohanin、肌毒素、富含半胱氨酸分泌蛋白、神经生长因子、血管内皮生长因子、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、kunitz 蛋白酶抑制剂等)[2-4]。
- 蛇毒的类型、危害与用途
1.1 蛇毒的类型
蛇毒大致可以分为三类,它们对人体的伤害方式不同,一种是通过神经毒,一种是血液毒,也还有两者兼有。
以血液毒为主的毒蛇有蝰蛇、腹蛇、竹叶青、五步蛇等,主要影响血液及循环系统,可引起人体溶血、出血、凝血及心脏衰竭。造成被咬伤处迅速肿胀、发硬、流血不止,剧痛,皮肤呈紫黑色,常发生皮肤坏死,淋巴结肿大。经 6-8 小时可扩散到头部、颈部、四肢和腰背部。病犬战栗,体温升高,心动加快,呼吸困难,不能站立。鼻出血,尿血,抽搐。如果咬伤后 4 小时内未得到有效治疗则最后因心力衰竭或休克而死亡。
神经类毒素广泛分布于眼镜蛇科和海蛇科,临床上常把它们与海蛇归为神经毒类毒蛇。根据作用机制的不同,主要作用于人们的神经系统引起肌肉麻痹和呼吸麻痹等。神经类毒素可分为突触后神经毒素(alpha;-神经毒素)、突触前神经毒素(beta;-神经毒素)及其他类型神经毒素。突触后神经毒素的致病机制主要是通过与神经肌肉接头处 N 型乙酰胆碱受体(n-AchR)结合而抑制化学神经递质乙酰胆碱(AchE)与受体结合,从而阻断神经-肌肉的兴奋性[1]。根据相对分子质量和二硫键数目,突触后神经毒素可分为短链神经毒素和长链神经毒素[5]。突触前神经毒素具有磷脂酶 A2 活性,可破坏突触前膜,造成乙酰胆碱大量释放并耗竭,从而阻断突触间兴奋的传递。部分海蛇毒液的毒性尤为厉害,如钩嘴海蛇毒液相当于眼镜蛇毒液毒性的两倍,是氰化钠毒性的 80 倍。纯海蛇毒的 LD50 一般小于 0.10mg/kg,如常见的青环海蛇为 0.05mg/kg,平颏海蛇为 0.06mg/kg。被咬伤的人,可能在几小时至几天内死亡。
1.2 蛇毒的危害与用途
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