VEGF受体胞外区的制备和活性鉴定文献综述

 2023-01-31 22:29:59

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

研究目的：

重组大肠杆菌中实现可溶性的人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区的表达,并鉴定其与配体VEGF结合的特异性，检测其在体内外的抑制血管生成的活性。为靶向血管抗肿瘤治疗和相关抗体的研究奠定基础。

研究方法：1）重组大肠杆菌Rosetta-gami（DE3）/pET22b-KDR3表达KDR3

已构建好的表达菌株接种，培养，IPTG诱导表达，离心收集菌体,渗透压休克法裂解细胞，离心，收集上清。2）SDS-PAGE检测目的蛋白是否表达3）Westernblotting鉴定目的蛋白4）目的蛋白依次经过镍离子亲和层析柱和DEAE阴离子交换树脂纯化5）ELISA检测KDR3和VEGF的结合6）Biacore检测表达产物与配体结合的动力学特征7）划痕抑制试验检测KDR3在体外抑制细胞迁移8）鸡胚尿囊膜模型检测KDR3在体内抑制血管活性文献综述：

以VEGF及VEGFR为靶点的血管生成抑制剂

摘要：肿瘤血管为肿瘤细胞的生长输送营养，也是肿瘤细胞播散的主要途径，以VEGF及VEGFR为靶点，阻断其信号转导或耗竭VEGF而抑制肿瘤血管的生成,则有望达到抑制肿瘤生长、发展和转移的目的。本文就以VEGF及VEGFR为靶点的血管生成抑制剂作一综述。

关键词：VEGFVEGFR血管生成抑制剂肿瘤

肿瘤的发生发展是一个非常复杂的过程，1971年，Folkma提出肿瘤的生长依赖于血管形成假说，当实体瘤生长超过1~2mm时，需要新生血管的介入和维持，否则将引起肿瘤的坏死、凋亡或处于休眠状态而无法继续生长或发生转移。因此抑制肿瘤血管新生，切断肿瘤细胞的营养供应和转移途径已成为肿瘤治疗的新策略。血管新生(angiogenensis)是一个受高度调控的多步骤过程，包括内皮细胞的分化、增殖、迁移和重塑，一系列生长因子与血管生成相关，其中血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)最为显著，是最重要的血管生成诱导因子，与人类恶性肿瘤的浸润和转移密切相关。以VEGF及其受体VEGFR为靶点治疗肿瘤是药物研究的热点。

1.VEGF

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