喜马拉雅密叶红豆杉内生真菌筛选与鉴定研究进展
摘要：紫杉醇是一种从红豆杉中分离得到的四环二萜类化合物。由于紫杉醇具有能特异性地与有丝分裂中期细胞的纺锤体微管蛋白结合，抑制其解体的特殊抗癌机理。国际医药市场对紫杉醇药用原料大量增加。本文针对可以产紫杉醇的喜马拉雅密叶红豆杉内生真菌的筛选与鉴定进行综述，主要是内生真菌筛选与鉴定、紫杉醇产量等。以期筛选出产量高的内生真菌，探索内生真菌与紫杉醇合成的关系，为紫杉醇的工业化生产提供参考数据。
关键词：分离纯化 种类 含量
- 文献综述
紫杉醇是一种从红豆杉树皮中提取的四环二萜类化合物，是红豆杉的次生代谢产物之一，是20世纪下半叶最有效的抗癌药物之一。
由于近年来癌症病发率逐年提高，抗癌药的需求量也逐年提高。紫杉醇是由红豆杉中分离得到的一种四环二萜类化合物。由于紫杉醇具有特异性地与有丝分裂中期细胞的纺锤体微管蛋白结合，抑制其解体的运作机理。因为其独特的抗癌机理被美国批准作为抗癌药上市，可以用于治疗卵巢癌、子宫癌和乳腺癌。为满足全球对癌症患者紫杉醇的需求，其生产途径也要求做到速度快、质量高。目前有的途径是：化学合成紫杉醇；提取人工栽培的红豆杉属植物；从组织培养的植物细胞中提取紫杉醇；用紫杉烷的前体10—去乙酰基巴卡亭Ⅲ（10—DAB）合成多西他赛（Docetaxel）；通过内生菌的大规模培养来生产紫杉醇及其前体10—去乙酰基巴卡亭Ⅲ（10—DAB）。
目前，化学合成紫杉醇的方法不具有生产价值和商业价值。从红豆杉植物中提取紫杉醇的方法对红豆杉植物的需求量过大，而红豆杉是我国一级保护植物，数量珍稀，因此用红豆杉的内生菌生产紫杉醇就是较为合适的方法。内生菌生长周期短、生物生长量大，且可通过诱变育种和控制发酵条件大幅度地提高紫杉醇产量。本文针对可以产紫杉醇的喜马拉雅密叶红豆杉内生真菌的筛选与鉴定进行综述，主要是菌落形态、菌丝特征、紫杉醇产量等。以期筛选出产量高的内生真菌，探索内生真菌与紫杉醇合成的关系，为紫杉醇的工业化生产提供参考数据。
1喜马拉雅密叶红豆杉内生真菌分离纯化
1.1内生真菌的获取
紫杉醇在密叶红豆杉的根、茎、叶中均有存在，不同部位获取的内生真菌紫杉醇的含量各不相同，根和茎的部位获得的内生真菌种类较多且紫杉醇产量较高，叶的部位内生真菌的紫杉醇含量相对较低，因此选取红豆杉靠近茎处根部的树皮来获得高产量的内生真菌是较理想的部位。
李勇超对红豆杉根、茎、叶三个部位的内生真菌的紫杉醇产量进行测定，共分离内生真菌186株，根、茎和叶分别为93、67和26株。根、茎、叶来源的产紫杉醇菌株的发酵液中紫杉醇的平均含量分别为248.57mu;g/L、149.09mu;g/L和104.94mu;g/L。
1.2内生真菌的分离纯化
