开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
[研究的主要目的和意义]
JK60为中枢神经系统(CNS)疾病的候选化合物,具有全新的化学结构,体外细胞实验表现出良好的药效。然而,JK60能否通过血脑屏障进入脑部目前尚不清楚,亟需建立方便快捷的检测方法,进行JK60的CNS成药性评价。常用的测定方法有免疫测定法、分光光度法、层析法等。其中,高效液相色谱(HPLC)法具有分离、分析速度快,分离效能高的优点。本实验拟建立测定JK系列(全部改为JK60)血药浓度和脑药浓度的高效液相色谱法(HPLC),并进行全面的方法学验证,测定小鼠颈静脉连续输注药物后的脑/血分配系数,评价药物进入脑部的潜力。
[拟研究或解决的问题]
1.1血浆、脑组织样品处理
确定血浆、脑组织样品处理方法,系统比较沉淀蛋白法、液液萃取法和固相萃取法。
确定小鼠给药方式及给药剂量。老鼠常用的给药方式有腹腔注射,皮下注射,肌内注射,灌胃,静脉输注,尾静脉注射等,由于候选药物极为珍贵,我们将选用颈静脉输注技术,易将药物达致疗效浓度,并可持续维持疗效所需的恒定浓度。
确定小鼠采血方法。我们拟采用颈静脉采血的方法,即在给药的另一侧动脉用采血针采血。
1.2 色谱条件确定
取待测药物、内标物质的标准物质,照拟定的分析方法进行测定,并通过调整色谱柱的型号或牌号(填料的形状、粒径、柱长度等)、流动相(组分及其配比)及其流速、柱温、进样量、内标物质的浓度及其加入量等条件,使待测药物与内标物质具有良好的色谱参数(n、R、T)及峰面积比值,并具有适当的保留时间(tR)以避开内标物质的干扰;选择适当的检测器,以获得足够的方法灵敏度。
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