- 研究背景
遗传毒性研究(Genotoxicity Study)是药物非临床安全性评价的重要内容，它与其他毒理学研究尤其是致癌性研究、生殖毒性研究有密切的联系，是药物进入临床试验及上市的重要环节。拟用于人体的药物，应根据受试物拟用适应症和作用特点等因素考虑进行遗传毒性试验。
遗传毒性试验是指用于检测通过不同机制直接或间接诱导遗传学损伤的受试物的体外和体内试验，这些试验能检出DNA损伤及其损伤的固定。以基因突变、较大范围染色体损伤、重组和染色体数目改变形式出现的DNA损伤的固定，一般被认为是可遗传效应的基础。
Ames试验是由美国加利福尼亚大学的Ames教授和同事于1975年首先创立，该试验是利用一组组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌的回复突变特性来进行的。此法现广泛应用于药物、食品、化妆品及医疗器械的遗传毒性研究，是应用最广泛的检测基因突变的体外试验。该法比较快速、简便、敏感、经济。众多学者有的用Ames试验检测食品添加剂、化妆品等的致突变性，由此推测其致癌性；有的用Ames试验检测水源水和饮用水的致突变性（比如，美国派斯净水器就通过了Ames试验），探索较现行方法更加卫生安全的消毒措施；用Ames试验研究化合物结构与致变性的关系，为合成对环境无潜在危害的新化合物提供理论依据；检测农药在微生物降解前后的致突变性，了解农药在施用后代谢过程中对人类有无隐患；还有用Ames试验筛选抗突变物，研究开发新的抗癌药等等。
- 研究原理与目的
- 研究原理
Ames试验是以组氨酸营养缺陷型的鼠伤寒沙门氏菌做为检测材料。筛选时共用五株菌：TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535。这些细菌不能合成它本身所需要的组氨酸，在没有组氨酸的基本培养基上不能生长。当菌株受到化学致癌物的作用时，可以产生回复突变，回复到原来菌株所具有的生物学特性，即能够自身合成组氨酸，从而可在没有组氨酸的基本培养基上生长。某些化学物质需经代谢活化才有致变作用，在测试系统中加入哺乳动物微粒体酶，可弥补体外试验缺乏代谢活化系统之不足。根据试验用菌与受试物接触后细菌的生长回变情况，确定化学物质有无致癌性及其强弱。
- 研究目的
进行化合物TAX临床前遗传毒理Ames评价，判断化合物TAX是否具有化学毒性。
- 研究方法
（一）菌株鉴定
1、菌株复苏：复苏 TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535 五株实验菌株。
2、菌株分离纯化：平板划线法。
配置鉴定所需溶液：营养肉汤培养基和营养琼脂培养基、50times;VB培养基、0.5mM 生物素溶液、0.5mM生物素/组氨酸溶液、顶层培养基、底层琼脂培养基、四环素溶液、0.1%结晶紫溶液、 0.1 M NADP溶液、 MgCl2-KCl溶液、PBS溶液、6-G-P
3、菌株扩增。
