- 课题背景
脑缺血是心血管疾病中最为严重的临床表现之一。心血管疾病是全球范围致病致死的一个主要原因，是一种严重威胁人类，特别是50岁以上中老年人健康的常见疾病，其中因脑缺血而死亡的比例占据首位。近几年，对脑缺血的发病机制及其治疗药物的发现取得了显著的进步，然而针对药物治疗具体症状的机制研究却不深入。目前研究证实吡拉格雷钠对脑缺血存在一定的治疗作用，尤其在对脑缺血引发的炎症有着显著治疗，因此本次实验针对吡拉格雷钠此作用及其机制进行深入探讨研究。
本次实验的受试药物为吡拉格雷钠（肉桂酸钠），是川芎嗪的结构修饰物。川芎嗪为伞形科植物川芎嗪的有效成分之一，即四甲基吡嗪（Tetramethylpyrazine）,具有抗血栓、改善血流变化、以及调节血栓素（TXA2）/前列环素（PGI2）失衡等药理作用，但由于其存在代谢快，半衰期短，造成延长给药间隔等缺陷，因此需根据生物电等排列原理，以奥扎格雷为模型设计出吡拉格雷钠。
研究已证明吡拉格雷钠对脑缺血再灌注大鼠血栓，血小板聚集，脑梗死脑水肿有较好的保护作用，本次实验炎症方面探讨吡拉格雷钠对脑缺血损伤的保护作用。TLR作为炎症细胞信号级联的途径始发者，在缺血性中风的炎症反应过程中具有重要的作用。己有研究证明TLR4在缺血性中风模型中表达上调，主要在小胶质细胞和神经元中表达， TLR4/NF-KB信号传导通路激活其下游炎症细胞因子如TNF-alpha;、IL-1beta;，使其上调，同时抑炎症因子IL-10，TGF-beta;也增加。以此为依据反映吡拉格雷钠对脑缺血炎症损伤的保护作用。
二、课题设计方法及实验基本操作技术
吡拉格雷钠对脑缺血再灌注治疗给药炎症作用的影响，在缺血再灌注1-3天内小胶质细胞，巨噬细胞大量增殖，在造完模立即给药之后，再连续尾静脉给药三天，检测促炎症因子TNF-alpha;、IL-1beta;，抑炎症因子IL-10，TGF-beta;的变化，以此为指标反映吡拉格雷钠治疗给药对大鼠脑缺血再灌注炎症损伤的保护作用。
（1）实验步骤安排：
- 采用改良线栓法，建立大鼠大脑中动脉栓塞脑缺血再灌注模型（MCAO）
- 制备大鼠脑组织蛋白的提取
- 检测炎症因子TNF-alpha;、IL-1beta;、IL-10，TGF-beta;
（2）基本实验操作技术
- 大鼠腹腔麻醉
- 大鼠尾静脉注射
- 大鼠大脑的取出及组织蛋白的提取
三、文献综述
近年来,人们逐渐对炎症反应在脑缺血再灌注中的作用产生重视。已有的大量证据表明, 炎症反应介导了脑缺血再灌注损伤。脑缺血再灌注过程中伴随着细胞因子和黏附分子的表达, 白细胞黏附, 大量蛋白水解的酶、氧自由基及花生四烯酸等代谢产物的产生, 破坏了脑毛细血管内皮细胞及基底膜，从而引起炎症，加剧对人体的危害。[2]探讨吡拉格雷钠对脑缺血/再灌注引发的炎症的治疗机制的最新进展, 有助于发现并采取有效的干预措施阻断炎症的级联反应, 对临床防治脑缺血再灌注损伤具有十分重要的理论和应用价值。
脑缺血再灌注损伤是多种机制参与的一种复杂病理生理过程，主要与自由基过度形成、兴奋性氨基酸毒性作用、细胞内钙超载、炎性反应等多种机制有关，多种环节因素之间又互相作用，进一步促进脑缺血/再灌注损伤后的神经功能破坏、脑梗死灶形成。[1]
