开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、课题的研究背景、意义和目的
查尔酮合酶（Chalcone Synthase， CHS）是陆生植物中最早出现的酶，在双子叶植物和单子叶植物广泛存在，在苔藓植物和蕨类植物中均有分布。查尔酮合酶是类黄酮类物质代谢合成途径中的关键酶，其催化了香豆酰CoA与丙二酰CoA生成查尔酮。查尔酮是类黄酮类物质的基本碳架结构，直接或间接地影响植物的花色，育性，抗病原侵染等能力。CHS基因是典型基因家族，其基因编码区十分保守，基因家族成员间的氨基酸一致性达到80%。目前，除金鱼草AmCHS基因为2外显子包夹2个内含子外，其他CHS基因均为2个外显子包含1个内含子结构。CHS的功能主要表现在色素合成、防御UV直接照射、抵抗病原体侵染、根瘤形成、植物育性、调节生长素运输、抗虫等方面功能，对植物体生长发育具有重要的意义。射干中查尔酮合酶的含量十分丰富，目前射干查尔酮合酶尚未报道，所以射干CHS研究显得尤重要。通过对CHS原核表达载体的构建及蛋白的成功体外表达，以深入了解研究射干CHS。本课题设计CHS引物,利用RT-PCR方法扩增基因,鉴定扩增基因后与T载体连接，再将连接物转入感受态细胞中。阳性菌落经酶切和测序鉴定，和质粒通过合适的DNA连接酶连接构建重组原核表达载体，转入大肠杆菌感受态细胞中进行蛋白表达，并为接下来的研究打下基础。
二、课题研究的主要内容
1、对射干查尔酮合酶原核表达的基础研究并进行蛋白表达
2、对后续射干研究打下基础
三、研究难点
1、对CHS引物的设计
2、目的基因的扩增和与载体的连接
3、原核表达载体的构建
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