- 选题的目的和意义
随着时代的发展和群众生活水平的提高,全球人的糖尿病的发病率日益提高,发病年龄降低,二型糖尿病及其并发症的防治已经成为一个普遍化的问题。糖尿病改变患者体内理化性质,经证实,患者口腔内的菌群也与健康人群存在差异,引发牙周炎等口腔疾病,严重者威胁患者的生命。
传统的抗生素抑制口腔致病菌的生长繁殖,但却存在打乱菌群平衡和增强菌种抗药性的弊端。红枣多糖是具有多种生物活性的天然产物,不仅具有抗氧化、降糖降血脂、抗炎抗肿瘤等生物活性,同时具有抑菌的功效。所以我们提取出红枣中的多糖,看其生物活性对糖尿病人口腔菌群有什么样的影响。为二型糖尿病并发症的防御及治疗提供新的理论基础和干预措施。
- 文献综述
- 红枣的营养成分
据中国农科院分析中心测定:中国红枣(干枣)含水量25%~30,糖45%~55%,粗蛋白2.92%,粗纤维2.41%,粗脂肪0.96%,磷0.09%~1.27%,钾0.61%~1.05%,钙0.03%~0.06%,镁0.03%~0.05%,维生素C 8.7mg/100g,维生素B1 0.17mg/100g,维生素B2 0.85mg/100g,维生素A 15.47IU,维生素E 3.83IU。红枣除含有上述常见的营养素外,还含有一些含量较少但具有很高生理活性的特殊功能成分,如多糖、环磷酸腺苷(cAMP)、黄酮、皂苷、三萜类物质等,这些功能成分是红枣具有多种保健功能的物质基础。
- 多糖的提取分离纯化
目前关于红枣多糖即职植物多糖的提取工艺已经研究得较为透彻,一般植物多糖采用热水浸提和有机溶剂沉淀法得到粗品,应避免在酸性环境下提取以至于糖苷键断裂。多糖粗提物中还含有蛋白质、小分子有机物、无机盐和色素等杂质,分离纯化的步骤包括脱蛋白、脱色和凝胶层析,进一步得到较纯红枣多糖产物。
- 国内外研究现状
随着人们对绿色食品观念的深入,天然保健品已经成为人们健康生活的首选,红枣系列功能性保健品的研发脚步日渐加快。红枣多糖因其独特的生理功能广泛应用于食品及医药领域,作为我国的独有资源,开发红枣及红枣多糖具有极其重要的现实意义。目前,红枣多糖的提取技术正趋于多样化,开发新的提取技术,通过多种提取方法联用提高红枣多糖的提取率是今后的研究热点;红枣多糖的生物活性随着科研工作者的研究会更加完善,红枣多糖的应用范围也会进一步扩大。
人类口腔中定殖了超过600种不同的细菌、病毒、真菌、支原体及衣原体等微生物物种,这些微生物组成了复杂的口腔微生物组。糖尿病及其并发症的发生发展与诸多因素有关,目前微生物因素已经成为研究的热点,研究者发现糖尿病患者的肠道及口腔菌群都不同于健康人群,糖尿病患者患口腔疾病如牙周炎的易感性明显高于健康人群。有研究表明,口腔菌群失调与二型糖尿病存在双向关系。
- 研究内容及研究方法
第一阶段(3月初到3月底):红枣多糖的提取。采用较为普遍的植物多糖提取与分离纯化方法,该过程中需保留部分粗品,与分离纯化后的纯品进行对比研究。需要经过水提醇沉法粗提,、三氯乙酸法脱蛋白、过氧化氢法脱色和凝胶层析等步骤来进一步分离纯化。
第二阶段(3月底到4月初):红枣多糖的理化性质测定。采用硫酸-苯酚法分别测定粗品、纯品的含糖量;分级分离出不同分子量的糖类,采用红外光谱法测定结构;高效液相色谱法测定不同组分的分子量。将样品糖含量、不同组分多糖结构和分子量作为后期研究的参数。
第三阶段(四月初到五月中旬):红枣多糖生物活性的研究,主要研究红枣多糖对糖尿病人口腔菌群的影响。首先确定正常人群与二型糖尿病患者口腔菌群具有一定差异性,在此基础上确定红枣多糖作用的最适浓度。其次,在确定红枣多糖对不同菌群有影响的前提下,利用选择培养基筛选特定菌种,例如致病菌白色念珠菌、放线菌等,同时用不同浓度的红枣多糖进行干预,研究其对不同菌种的影响状况。最后通过探究红枣多糖对口腔菌群的影响,揭示微生物与环境间的相互关系;同时筛选功能基因,揭示微生物与疾病之间的关系;分析红枣多糖对特定菌种的时效和量效关系。为预防及治疗糖尿病并发口腔疾病提供新的理论基础。
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