ABCB1 C3435T位点突变与甲氨蝶呤耐药性和毒性的关联性研究
【前言】
甲氨蝶呤（methotrexate，MTX）是一种叶酸还原酶抑制剂，为抗叶酸类抗肿瘤药，其机制是通过抑制二氢叶酸还原酶，阻碍DNA合成，其选择性地作用于S期，抑制细胞生长繁殖，属于细胞周期特异性药物。临床治疗主要针对于白血病（特别是急性淋巴细胞白血病ALL）、类风湿性关节炎和淋巴瘤；另外，甲氨蝶呤对头颈部肿瘤、乳腺癌、肺癌等实体肿瘤也有一定疗效。而MTX的药物代谢和药效受到多种遗传和环境因素的影响，研究发现[1]，肿瘤细胞膜上表达的跨膜蛋白转运体P-糖蛋白(P-glucoprotein，P-gp)可以将MTX等药物泵出细胞，导致细胞内甲氨蝶呤浓度降低，不能发挥其细胞毒性作用，而产生肿瘤细胞耐药反应；而胞外MTX浓度增高，出现毒性反应，使患者出现相应不良反应。常见的不良反应包括骨髓抑制，中枢神经系统损害，粘膜溃疡，肝脏损害，肾脏损害，胃肠道不良反应；而编码P-糖蛋白的多药耐药基因1(多药耐药基因1 multi- drug resistance 1,MDR1，又称为ABCB1，ATP-binding cassette subfamily B member 1)变异,可导致其编码的P-糖蛋白转运活性降低，MTX泵出细胞也减少。初步可以推测MDR1基因的突变或者其编码的蛋白表达水平改变，会通过影响P-糖蛋白的表达或（及）活性改变疾病对药物的反应性，即出现耐药反应或毒性反应。多药耐药基因1多个位点中，C3435T位点研究较多，因此,我们从MDR1基因的C3435T位点入手，研究其与临床治疗中MTX出现毒性及耐药性的关联，并根据meta分析的结果，对指导临床患者用药起一定的参考与帮助作用。
【方法】
方法 :检索Pubmed、Cochrane、EMBASE、Sinomed、CNKI中国期刊全文数据库和万方数据库中有关ABCB1 C3435T位点基因多态性与MTX毒性（toxicity）及耐药性（efficacy and response）关联性的临床病例对照研究，并采用手工检索的策略收集国内外数据库自建库以来至今发表的有关ABCB1 C3435T多态性与MTX毒性反应与耐药关联性的病例对照研究，筛选出的符合入选标准者应用Revman 5.3软件进行Meta分析,比较携带不同基因型的人群（ABCB1 3435 CC vs 3435CT/TT)中MTX毒性反应及耐药性发生率的差异。
首先通过浏览阅读文献的标题和摘要进行初步筛选,排除不符合要求的文献，包括其他基因位点与甲氨蝶呤毒性与耐药性的研究、其他药物与ABCB1 C3435T基因多态性研究、甲氨蝶呤毒性与耐药性的细胞系体外实验或动物实验等不涉及临床病例的机制研究等等。然后通过阅读浏览全文，对初筛后的文献进行二次筛查，最终根据纳入排除标准来纳入文献。最后对入选文献进行数据提取,包括文献的标题、作者、发表年份,研究对象的国别、种族、性别、年龄，临床原发疾病的种类、病程，临床使用MTX的治疗方案、疗程、剂量、联合用药的种类、给药方案，ABCB1 C3435T位点不同基因型的人群对MTX甲氨蝶呤毒性反应及耐药的发生率差异等。由两名研究者分别独立进行上述全过程，其中对于文献，尤其是纳入排除文献时，意见不同者通过讨论决定。
本次meta分析的研究对象包括以下条件：1.类风湿性关节炎、白血病及实体瘤肿瘤患者；2.能直接或通过换算获取ABCB1 C3435T野生基因型和突变基因型基因频率，以及不同基因型人群中MTX不良反应和（或）耐药性发生率；3.对于上述中存在数据不完整的研究，向作者发函索取详细数据信息，若仍不能获得数据，则剔除该研究。
技术路线：设计检索式→检索数据库→获得文献并根据纳排标准进行初筛→二次筛查→浏览全文后获得纳入文献→提取数据→统计分析（Revman 5.3）→根据统计结果得到结论。
【进度安排】
