- 选题的背景及实际意义：
- 中药是指在中医理论指导下，用于预防、治疗、诊断疾病并具有康复与保健作用的物质。中药主要来源于天然药及其加工品，包括植物药、动物药、矿物药及部分化学、生物制品类药物。近年来，由于中药配方颗粒的迅速发展，中药研究也受到了广泛关注，本文从中药三七的薄层色谱鉴别角度出发，审视三七的研究现状，探讨药典对其规定的检测方法中的问题，研究优化其薄层色谱检测方案，具有现实性的意义。
- 三七 Notoginseng Radix Et Rhizoma，中药名。为五加科人参属植物干燥的三七 Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen的干燥根和根茎，一般秋季花开前采挖，洗净，分开主根、支根及根茎后干燥而得。支根习称“筋条”，根茎习称“剪口”。三七味甘微苦，具有散瘀止血，消肿定痛等功效，主要用于治疗咯血、吐血、便血、崩漏、外伤出血及跌扑肿痛等症；三七的应用在我国具有悠久的历史，明代巨著《本草纲目》就对三七有详细的描述[1]。近年来，中药三七以及饮片存在相对比较严重的真伪问题，其价格又相对比较昂贵，所以，中药药材市场中存在藤三七、菊三七、竹节参、莪术等三七伪品代替。
- 研究计划及主要内容：
- 目前的研究方法：2015版《中国药典》对三七的薄层色谱法鉴别进行了规定：取三七粉末0.5g，加水5滴，搅匀，再加以水饱和的正丁醇5ml，密塞，振摇10分钟，放置2小时，离心，取上清液，加3倍量以正丁醇饱和的水，摇匀，放置使分层（必要时离心），取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rg1对照品及三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各lmu;l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15：40：22：10）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸溶液（1→10），在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯（365nm）下检视，显相同的荧光斑点[2]。
- 拟突破的问题：根据药典中规定的薄层检测进行实验，发现在实际的鉴别检测过程中，人参皂苷Re和三七皂苷R1的分离效果不好，谱带相近，信息量复杂。结合中药化学理论知识及薄层色谱分离原理可知，这是由于人参皂苷Re和三七皂苷R1（结构式如图）两者结构、化学性质相似，极性相近，故当用薄层色谱法进行鉴别时，二者的Rf值相近，因此采用现有的条件及方法无法达到较好的分离效果。
- 拟解决的方案：针对人参皂苷Re和三七皂苷R1的结构和分离特点，结合对薄层色谱分离程度产生影响的因素，本研究通过考察调整展开剂的比例，展开温度，湿度及展开方法等影响因素，完善三七薄层鉴别检测实验方案，增加三七薄层鉴别中人参皂苷Re和三七皂苷R1的分离度，优化三七薄层鉴别检测的重现性及稳定性。
三、文献综述
1. 课题简介：本课题主要研究三七薄层色谱过程中人参皂苷Re和三七皂苷R1的分离及其优化，拟通过调整展开剂的组成、温度、湿度等影响因素，改善色谱行为，增加分离度，使复杂的信息明确化，并改善其重现性及稳定性。
2. 关于该课题的研究现状及趋势：三七作为我国传统中国特色的一种中药材，受到历史文化及发展趋势等各方面的影响，对于中药三七的研究国内较成熟于国外，国外的研究主要集中探索三七中化学物质的药理作用，例如探讨三七总皂甙抗冠状动脉粥样硬化的分子机制[3]；而国内的研究相对较为广泛，归纳了三七中所含的皂苷类的化学成分，药典中描述了三七的形状、性质并规定了其检测方法，也有很多研究报道涉及通过测定皂苷含量对人参及其制剂进行鉴定，其中对于薄层色谱的检测，李德勋和张春丽两位教授针对复方丹参片中三七的鉴别方法进行了探讨和比较[4,5]，主要从样品的制备方法上对其进行了改进；而李霄在《薄层色谱对复方丹参片中三七皂苷R_1和人参皂苷Re的鉴别》一文中详细介绍了其优化方法，主要从以下几个方面开展实验：a.展开系统：比较了3种展开系统，氯仿-甲醇(7∶3)，氯仿-醋酸乙酯-甲醇-s水(15∶40∶22∶10)，氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置过夜分层的下层溶液，观察三七皂苷R1和人参皂苷Re在色谱带上的分离程度、谱带清晰度及相关信息量；b.温度、湿度：温度高于10℃，湿度高于50％，人参皂苷Re和三七皂苷R1在色谱带上不能完全分离。c.实验操作：若展开前不充分饱和，对色谱分离也有一定影响[6]。
3. 结论：目前对于三七的研究时间短、成果少，尚未引起充分、广泛的重视，且对于目前所发现的问题----人参皂苷R1和三七皂苷Re在薄层色谱上分离度不佳----没有良好的解决办法。因此本课题的开展以此为基础，结合已有的研究成果及实际问题，拟解决其分离问题，优化其鉴别方法。
四、实验进度：
- 2020年3月：根据课题研究的方向，独立进行查阅文献，了解课题并完成开题报告；
- 2020年4月-5月：进行试验，掌握2015版《中国药典》对三七的薄层色谱法鉴别方法，调整相关影响因素进行重复实验，做好实验进展情况记录并完成中期检查；
- 2020年5月-6月：分析数据；评价及优化三七的薄层色谱鉴别方法，并完成毕业论文、完成答辩。
五、参考文献:
[1] 张静静，刘桂芹，王庆鹏，李兰杰.植物三七中皂苷类化学成分的研究进展[J].聊城大学学报(自然科学版)，2018，31(02):43-52 59.
[2] 《中国药典》一部，2015.
[3] Yang Zheng,Zhang Hui,An Ming,Bian Mengni,Song Miao,Guo Xiaohua,Liu Quanli,Qiu Min. Total Panax notoginseng saponin inhibits balloon injury-induced neointimal hyperplasia in rat carotid artery models by suppressing pERK/p38 MAPK pathways.[J]. Brazilian journal of medical and biological research = Revista brasileira de pesquisas medicas e biologicas,2020,53(1).
