黄酮类化合物FV-429抑制人前列腺癌细胞生长的作用研究文献综述

 2023-02-10 01:00:50

1. 课题来源:自然科学基金与部、省、市级以上科研课题

2. 研究目的: 前列腺癌是目前西方国家男性健康的重要隐患之一,其发病率位于西方男性肿瘤发病率前三位,同时,在我国男性肿瘤中,前列腺癌的发病率逐年趋增,因而被人们不断重视。而黄酮类化合物如汉黄芩素等,经之前诸多实验证明对肿瘤细胞的生长有较好的抑制作用,而FV-429作为一种双(2-羟乙基)氨丙氧基化黄酮类化合物的衍生物,可能也存在类似的抗肿瘤活性。因此,我们希望通过体内外实验的方式来研究其是否FV-429也能像其他黄酮类化合物一样发挥出明显的抗肿瘤作用。

3. 研究内容:本课题拟在多种前列腺癌细胞株、前列腺癌异位移植瘤裸鼠模型、人前列腺癌原代细胞LNCaP和22RV-1中证明FV-429的抗肿瘤活性,进而通过多种分子药理学方法研究FV-429对肿瘤细胞活力的抑制作用,对细胞周期的阻滞作用,对细胞凋亡的诱导作用,以及对裸鼠异体移植瘤生长的抑制作用。

4. 研究手段: 经设置对照组,给药组和抑制剂组并对多种前列腺癌细胞株和人前列腺癌原代细胞株LNCaP和22RV-1进行细胞培养后,通过MTT四氮唑盐染色法,流式细胞术以及western blot等手段检测肿瘤细胞活力,细胞凋亡率,以及细胞内相关凋亡蛋白和其他相关蛋白的表达水平,并通过对照组,给药组和抑制剂组的比较,从而确定FV-429对人前列腺细胞生长的抑制效果:

① 通过倒置显微镜对细胞进行观察并加以细胞形态学分析,同时使用MTT法检测前列腺癌细胞活力,进而通过比较不同组别的细胞生长状态来初步评价FV-429的抑制作用。

② 通过流式细胞术和Annexin V/PI双染实验检测细胞周期并分析细胞凋亡情况,并比较不同组别间的差异,进一步分析FV-429对细胞生长的抑制作用。

③ 通过免疫共沉淀法,western blot和激光共聚焦显微镜等手段定性定量地分离并检测与细胞凋亡通路相关蛋白的表达水平及各蛋白间的相互作用,以深入研究FV-429抑制细胞生长的机制。

④ 通过ROS检测试剂盒检测凋亡细胞汇总活性氧自由基的含量,以判断FV-429会导致ROS参与前列腺癌细胞的凋亡。

⑤ 通过siRNA沉默相关凋亡基因完成对相关基因的敲除,并验证这些基因的表达是否会控制前列腺癌细胞的凋亡,并在各组别间比较结果,进而检验相关凋亡通路是否会最终导致前列腺癌细胞的凋亡。

⑥ 通过构建裸鼠异体移植瘤动物体内模型,并将之分组后,通过比较不同组别间移植瘤的直径或面积进而判断FV-429在体内对肿瘤的抑制作用

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