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一、文献综述冬青科植物内含4属，约400-500种，其中绝大部分种为冬青属，分布中心为热带美洲和热带至暖带亚洲。我国产一属即冬青属，约204种，分布于秦岭南坡、长江流域及其以南地区，以西南地区最盛，华东地区约有60种(包括变种和变型)，其中不少种类是我国传统的中药材，如枸骨、冬青等，常用民间草药有毛冬青、铁冬青、猫儿刺等［1］。作为冬青科最大的一属植物，冬青属植物具有着广泛的药用价值、园艺观赏价值以及实用工艺价值。近年来，冬青属药用植物，无论在临床和民间使用方面都有新的发展［2］，其化学成分和药理作用等方面的研究也取得了较大的进展［3］，但在显微结构方面的研究却并不全面，除了对于我国本土的植物涉及很少以外，对于近年来我国引进的一些栽培变种的相关研究资料更是少之又少。本次试验选取了五种冬青属的植物，通过对这些植物的叶、茎的显微结构研究，总结冬青科植物的显微结构特征，及同科植物不同种之间的显微结构差异，为冬青科植物的分类、显微鉴定以及相关科学研究提供可靠的科学依据。 1. 形态特征冬青属植物是冬青科最大的一属植物，为常绿木本植物，稀落叶，有乔木、灌木等多种形［4］。本属植物多为常绿树种，树冠优美、果实通常红色光亮，长期宿存，为良好的庭园观赏和城市绿化植物；花多而密，为良好的蜜源植物；木材坚韧细致［5］。 1.1 北美冬青 北美冬青 (Llex verticillata ) 又名轮生冬青、美洲冬青，为冬青科冬青属 (Ilex linn.) 多年生灌木。北美冬青与冬青科大多常绿树种不同，其特点是冬季落叶。落叶后，密集、亮丽的红果挂满枝头，十分耀眼和喜庆。在欧美北美冬青作为切枝观果、景观美化等广泛栽培应用。北美冬青树高2 ～3 m，浅根性，主根不明显，须根发达；叶互生，单叶，长卵型，边缘硬齿状，表面无毛、绿色，嫩叶古铜色，叶背面略白且多毛；雌雄异株，花白色，着生叶腋处，雌花3～6朵丛生，雄花几十朵丛生；浆果，红色，2～3果丛生，单果种子数为4～6粒。北美冬青于3月下旬萌芽，4月上旬春梢生长，萌蘖性强、耐修剪；5月中旬开花，花期半个月，雄花早2～3d开，至6月初与雌花同时结束，边开花边结果。10月上旬果色转红，12月上中旬落叶；挂果期至翌年4月。北美冬青的生育特性是喜光，亦耐半阴，喜肥沃微酸性到中性土壤，弱碱性土壤亦能适应，喜温暖湿润环境，耐湿性、抗寒性强，适于我国大部分地区，如长江流域及其以北地区生长、繁殖［6］。 1.2 珊瑚冬青 珊瑚冬青别名红果冬青、野白蜡叶，冬青科冬青属。常绿灌木或乔木，高3-10米；小枝圆柱形，细瘦，具纵棱，淡褐色，无毛或被微柔毛，三年生枝具小的皮孔及稍突起的狭三角形叶痕；叶片革质，卵形，卵状椭圆形或卵状披针形，边缘波状，具圆齿状锯齿，稀齿尖刺状，叶面深绿色，背面淡绿色，两面无毛，或叶面沿主脉疏被微柔毛，主脉在叶面凹陷，背面隆起，侧脉每边7-10条，在两面均凸起，网状脉在两面明显；叶柄紫红色，上面具浅槽，无毛或被微柔毛，下面具横皱纹。花序簇生于二年生枝的叶腋内，总花梗几无，苞片卵状三角形，具缘毛；花黄绿色，4基数。子房卵球形，顶端近截形，柱头薄盘状。果近球形，成熟时紫红色，宿存柱头薄盘状，4裂；宿存花萼平展。分核4,椭圆状三棱形，背面具不明显的掌状纵棱及浅沟，侧面具皱纹。花期4-5月，果期9-10月[7]。 1.3 枸骨枸骨又称猫儿刺（本草纲目），老虎刺、八角刺（中国高等植物图鉴），鸟不宿（云南植物志），构骨（误写，浙江植物志），狗骨刺（江西安福），猫儿香、老鼠树（江苏植物志），为冬青科构骨属常绿灌木或小乔木，原产于我国长江流域及以南各地。其形态古雅、叶形奇特、四季常青，秋果红艳、具有极大的观赏价值。枸骨枝叶稠密，叶形奇特，深绿光亮，为常绿灌木或小乔木。高3～4米，最高可达10米以上。树皮灰白色、平滑不裂，枝开展而密生。叶硬革质，长4～8厘米，宽2～4厘米，顶端扩大并有3枚大而坚的硬刺齿，中央一枚向背面弯，基部两侧各有1～2枚大刺齿，表面深绿色而有光泽，背面淡绿色；叶有时全缘，基部圆形，这样的叶往往长在大树的树冠上部。花小、黄绿色，簇生于2年生枝叶腋，核果球形，鲜红色，直径8～l0厘米，有4核，花期4～5月，果期9～10月，11月成熟[8]。 1.4 无刺枸骨无刺枸骨为冬青科构骨变种，常绿灌木或小乔木，因叶片边缘无刺状齿而得名。入秋后红果满枝，经冬而不凋，四季常青。无刺枸骨树高可达2.5至四米，皮灰白色，树干光滑，小枝粗壮，无毛。树冠卵圆形，叶色茂密无刺齿。叶卵形或卵圆形，革质，表面浓绿光亮，花期为4到5月份，花小黄绿色。果期为9-11月，核果球形，初为绿色，入秋后红果满枝，冬雪不凋，鲜艳可爱[9]。 1.5 大叶冬青大叶冬青(llex latifolia Thunb)系冬青科冬青属植物，又名苦丁茶，为常绿乔木，生长于山坡竹林内及灌木丛中，在我国主要分布于长江中下游各省及福建等地[10]。大叶冬青为常绿乔木，树干高达20m；小枝粗壮有纵棱，单叶互生、原革质，长圆形或卵状长圆形，先端短渐尖或纯尖、边缘有疏生锯齿、柄短粗、有皱纹；花单性、雌雄异株、黄绿色；果实球形、成熟时红色或棕红色；种子骨质；花期为4～5月，果实成熟期为 10～11月[11]。 2. 化学成分及药理活性冬青属植物其化学成分主要为三萜及其皂苷、黄酮类、香豆素、木脂素、糖脂类等化合物，多用于清热解毒、消炎、镇咳、祛痰及治疗心血管疾病[12]。 2.1化学成分 2.1.1 三萜及其皂苷：三萜类皂苷在冬青属植物中分布广泛，苷元主要为五环三萜，按其分类，可大致分为乌索烷型、齐墩果烷型、羽扇烷型[13]。 2.1.2 黄酮及多元酚类化合物：Martinez等对59种冬青属植物黄酮类化合物成分进行了研究发现3种黄酮醇：山亲酚、槲皮素、异鼠李索．同时发现两种黄酮：芹菜素与木犀草素[14]。 2.1.3 其它类型化合物：：Hiroyuki等从大柄冬青Ilex macropoda中分离得到3个新的倍半萜苷aohaha glueoside A～c，同时得到1个新苯酚苷[15],。林立东等从华中冬青Ilex centrochinesis中分得1新氰基化合物华中冬青醇huazhongilexol和1新木脂素华中冬青素huazhongilexin[16]。 2.2药理活性 2.2.1 降压作用 苦丁茶冬青提取物(EIK)0.05g／kg静脉注射，正常血压麻醉犬即可产生明显作用．对二肾r夹型高血压大鼠(2KICH)和自发性高血压大鼠(SHR)降压作用明显[17]。 2.2.2 抗炎抗菌作用：枸骨叶冬青llex aquifoliumL乙醇提取物可抑制牛血多形校白细胞(PMNL)中白三烯(LB4)的合成(IC50=60mu;g/ml)，并呈剂量相关，同时可抑制过氧化自由基诱发生的非酶促脂过氧化．从而产生抗炎作用[18] 2.2.3心血管药理作用：从苦丁茶冬青中分离得的三萜化合物为乙酰辅酶A胆固醇酰基转移酶(ACAT)抑制剂，可作为治疗动脉硬化的新药[19] 2.2.4降脂消肥作用：苦丁茶冬青提取物(ELK)连续Ig，可显著降低肥胖大鼠腹部皮下脂肪指数．具消肥作用[20]。 2.2.4抗肿瘤活性：毛冬青本身没有抗癌作用，但是它作为抗癌增敏剂，能提高放射对鼻咽癌原发肿瘤及颈淋巴结的近期灭癌效应，尤其对中晚期患者效果更好[21]。 2.2.5抗氧化活性：。苦丁茶提取物对大鼠肝组织体外试验表明其有较强的抗脂质过氧化作用，提示其有治疗炎症、预防心脑血管疾病、防癌、延缓衰老等保健作用[22]。 2.2.5抗生育作用：枸骨(Ilex comuta)可以终止小白鼠的早、中、晚期妊娠，终止大白鼠的早期妊娠，黄体酮不能对抗其对小白鼠的抗早孕作用，豚鼠、大白鼠离体子宫实 验证明其对子宫有兴奋作用[23]。 3.叶表皮显微结构特征 中国冬青属植物的下生气孔器类型以双环列型为主，少数为环列型、三环列型及辐射型，因此双环列型是冬青属植物气孔器的基本类型．除具有正常气孔器外，绝大多数冬青属植物都具有大气孔器，其大小明显大于正常气孔器，周围的表皮细胞和正常气孔器呈辐射状排列。 大气孔器、退化气孔和瘿状结构可以作为界定冬青属的证据；叶表皮细胞的大小、形状、垂周壁形态和表面纹饰以及表皮毛的有无和长度可作为冬青属下种间分类的辅助证据[24]。 3. 药用功效 冬青属植物多数可作为民间草药及制药业的原料药材利用，在防病治病方面发挥着重要作用。榕叶冬青治疗肝炎、跌打损伤；，毛冬青用于风热感冒、肺热喘咳、喉头肿、闭塞性脉管炎、心肌梗塞、心绞痛、扁桃体炎；冬青用于风湿痹痛、痔疮；铁冬青用于感冒发热、风湿痛、咽喉肿痛、胃痛、痢疾、胰腺炎、烫伤，无名肿毒；亮叶冬青用于关节痛、烧、烫伤、创伤出血[25]。大叶冬青嫩叶人药，有清热解毒、止渴生津的功效，用于风热头痛、目赤肿痛、鼻炎、口腔炎、斑痧肿痛，病后烦渴，疟疾，另可作茶的配料，亦可用于高血压等症。枸骨叶、根 、树皮均可人药。叶有清虚热、益肝肾、祛风湿的功效，用于阴虚劳热，咳嗽咯血，头晕目眩，腰膝酸软，风湿痹痛，白癜风等；根和树皮有补肝益肾，疏风清热的功效，用于腰膝痿弱，关节疼痛、头风、赤眼、牙痛、荨麻疹[2]。 4. 研究现状及展望近几年来，在植物的栽培及药用领域对冬青科植物的研究都有较大进展，但对常见品种及一些外来引进的栽培品种的显微结构研究还存在较大的空白，需要采用科学有效的实验方法对该科植物进行研究、分析，为种植资源调查、药材真伪鉴别提供科学依据。这也正是我们进行本次试验的意义和目的所在。二、研究方法 1、科学、合理的采集实验材料，并对实验材料进行适当的处理，以便进行切片、制片 2、采用一般制片技术与冷冻制片技术，对实验研究对象的叶表皮、叶肉、幼茎、粉末依次进行制片，在电子显微镜下进行观察。 3、表皮撕取方法：取新鲜材料，用刀片在表面轻轻浅划一刀，再用小镊子从切口处撕取表皮，将表皮外面向上置于载玻片上，切去带表皮下部组织的那部分表皮，以甘油酒精装片即可观察。削取表皮法：用徒手切片的方法，使刀片与材料表面平行削取表皮（稍带1~2层表皮下组织无妨），装片即可。三、实验材料本实验选择南京地区五种冬青科植物栽培品种进行实验研究。采集地：中国药科大学江宁校区植物园材料名称：大叶冬青（Llex latifolia Thunb）、珊瑚冬青（Llex corallina Franch）、北美冬青（Llex verticillata）、构骨（Ilex cornuta Lindl）、无刺枸骨（Llex corunta Var.fortunei）的叶、幼茎及粉末。四、实验预期 通过对冬青科种五种栽培品种的叶、茎的显微结构研究，总结冬青科植物的显微结构特征，及同科植物不同种之间的显微结构差异，为冬青科植物的分类、显微鉴定以及相关科学研究提供可靠的科学依据。
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资料编号：[369575]
