开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、 立题背景及研究现状
随着社会的发展,人们的生活水平得到了极大的改善,但由于生活节奏的加快,人们生活工作的压力越来越大,使人们的生活方式和饮食习惯发生了巨大的变化,各种代谢相关疾病亦随之而来。心血管疾病已经成为人类健康的头号杀手,动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)又是属于心血管疾病中比较常见的一类疾病,有数据显示中国大约有2000万AS患者,由于饮食结构的改变等其他因素,每年都会递增60万人左右。血管内皮功能紊乱不仅是As 形成之前的一个早期表现,在As 的发展过程中也起着极为重要的作用。许多研究表明,通过改善内皮细胞紊乱可以降低AS的发病率[1-3]。
科罗索酸是存在于大叶紫薇、枇杷等植物中的一种三萜化合物。近年来研究发现其具有降血糖、减肥、抗肿瘤、抗炎、抗病毒和抗心血管疾病作用,尤其是其较好的降血糖活性,具有类似胰岛素的生理作用,被称为植物胰岛素。现有实验表明,科罗索酸具有抗动脉粥样硬化的作用,而内皮功能紊乱是动脉粥样硬化早期发病过程中的一个关键因素,我们推测科罗索酸对改善血管内皮紊乱具有重要作用,并对其作用机制进行初步探讨[4-5]。
二、 研究内容和研究目标
2.1研究内容
1. 利用原代血管内皮细胞建立血管内皮功能紊乱模型
用短时间高糖刺激内皮细胞,建立内皮细胞氧化应激的模型。
2. 研究科罗索酸改善内皮功能紊乱的作用
用流式细胞仪测定细胞内活性氧(ROS),以说明科罗索酸通过抑制氧化应激来改善内皮功能紊乱;用流式细胞仪检测内皮细胞的凋亡率,以证明科罗索酸对血管内皮细胞凋亡具有改善作用;用Western Blot 检测Nrf2,且用Q-PCR来检测其下游靶标如HO-1 mRNA、NQO1 mRNA与UGT1A1 mRNA的表达,以说明科罗索酸通过调节Keap1-Nrf2/ARE信号通路来抑制氧化应激。
