课题名称 巨噬细胞炎症小体激活的研究方法一、拟研究的问题NLRP3 炎性小体是一种分子量约为 700Kda 的大分子多蛋白复合体，能被多种病原相关的分子模式或损伤相关的分子模式 活化，对固有免疫系统免疫功能的发挥具有极其重要的作用。
但如果其被过度激活则可通过活化的半胱天冬酶 -1 持续地将 pro-IL-1beta; 和 pro-IL-18 剪切为成熟的 IL-1beta; 和 IL-18，进而激活下游信号转导通路，产生大量的炎性介质，引起机体发生严重的炎 症反应，最终促进多种炎症性疾病的发生与发展。
对 NLRP3 炎性小体进行深入的研究不仅有助于阐释固有免疫系统如何有效地发挥其免疫功能，而 且作为系列炎症反应的核心，NLRP3 炎性小体还可能成为多种炎症性疾病防治的新靶点。
我们就 NLRP3 炎性小体的激活及调控方法作一综述。
二、研究目标、采用的手段 研究目标：目标药物是否能够对炎症小体的发生发展及调控起到抑制作用 研究手段：1. 获得小鼠骨髓原代细胞1.1 选取普通健康雄鼠五只，取其两侧大腿骨，用PBS将小鼠骨髓细胞吹入离心管内备用1.2 将其高速离心放入-20℃备用2. 建造病理模型2.1 加入DMEM、L929和10%牛血清培养大约一周2.2 1.培养细胞诱导巨噬细胞分化3.检测蛋白表达情况3.1 使用细胞裂解液裂解细胞检测总蛋白含量3.2 收集细胞上清检测细胞表达蛋白种类4.检测炎症因子三、文献综述前言炎症小体( inflammasome) 是细胞内模式识别受体( PRR) 参与组装形成的大分子蛋白复合体，是参与机体固有免疫的 重要成分。
宿主细胞可通过 PRR 识别病原体相关分子模式( PAMP) ，组装成炎症小体，激活下游的信号通路，诱导炎症因子分泌，在抵抗病原菌入侵及维持机体免疫系统稳定中起重要作用。
NLＲP3 炎症小体是目前研究最多、 机制最清楚的炎症小体，它由 NLRP3、ASC 和 caspase-1 组成。
其活化须通过 ASC 提供 CARD 募集 pro-caspase-1。
主题炎性小体的概念最早于2002由Tschopp研究小组提出，其作为一个大分子能够引发炎性的半胱天冬酶的活化。
