开题报告内容：
一、研究背景：
乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤，全球流行病学研究表明,在女性恶性肿瘤中,乳腺癌的发病率和死亡率高居首位,我国乳腺癌的发病率也呈逐渐上升趋势,已经成为严重影响妇女身心健康甚至危及生命的最常见的恶性肿瘤之一。肿瘤是一种多因素的复杂疾病，至今未有有效的药物治疗手段，常伴随着转移和复发。在乳腺癌中有一部分被称之为三阴性乳腺癌，因其不表达Er、Pr、HER2，所以很多激素的抗肿瘤药物不能杀死这些肿瘤导致其一直是治疗的难点。
随着肿瘤干细胞学说的提出，大多数学者认为肿瘤干细胞是肿瘤复发转移的根源。乳腺癌干细胞是一群未分化,具有自我更新、多向分化潜能的细胞。化疗及放疗抵抗性、缺氧耐受性、高致瘤性、高侵袭转移性是这群细胞的特征,成为乳腺癌难以根除、日后复发的一个重要原因。
乙醛脱氢酶(ALDH、ALDH1A或RALDH)是催化细胞内乙醛氧化为乙酸的细胞溶质酶,也是正常干细胞与肿瘤干细胞(CSC)的通用标记物之一,在多种组织中起重要作用。在乳腺癌临床研究中,ALDH1的高表达与乳腺癌的发生、发展、预后和转移密切相关。2007年,Ginestier等[1]首次t通过ALDH1在乳腺癌实体组织中发现了乳腺癌干细胞，为后期的研究奠定基础。除此之外，2003年, Al-Hajj等[2]]研究发现, CD44 /CD24-/low/Lin-是区分细胞成瘤能力的很好的分子标记。这群细胞只需200个就可以在NOD/SCID鼠中形成肿瘤,而分选出该细胞群后剩余的其他细胞无致瘤性,证实了乳腺癌干细胞的存在。随之针对于乳腺癌干细胞的新药筛选已成为研究热点。
20世纪80年代中期产生的高通量药物筛选（high throughput screening，HTS）以一些已知的或潜在的生物分子作为靶点，对利用组合化学和天然产物生成的大量化合物样品进行筛选，是为寻找先导物而针对大量样品进行药理活性评价分析的一种技术手段，对于创新药物的研究和开发具有很重要的作用。但是传统的、针对单一靶点的研究方法难以适应像肿瘤、神经退行性疾病和代谢性疾病等多基因疾病，以及通过病毒感染方法等治疗药物的研究。而高内涵筛选（high content screening，HCS）技术出现之后，人们能够在与疾病相关的信号通路和网络水平上研究药物的代谢途径、作用机制和潜在毒性等，也使在细胞水平全面评价活性化合物的成药性成为可能[3]。.HCS是根据在细胞内获取多个靶标的荧光数据，而建立起来的复用的、功能性的筛选方法。并且HCS能够在保持细胞结构和功能完整性的前提下，检测被筛样品对细胞形态、生长、分化、迁移、凋亡、代谢途径及信号转导等各个环节的影响。此外，HCS还能在单一实验中获取大量与基因、蛋白及其他细胞成分相关的信息，确定其生物活性和潜在毒性。同时，HCS也是一种应用高分辨率的荧光数码影像系统，旨在获得被筛样品对细胞产生的多维立体和实时快速的生物效应信息，在细胞水平上检测多个指标的多元化、功能性筛选技术平台。
二、研究目的与意义
本课题旨在建立稳定的乳腺癌细胞系高内涵筛选体系，以期获得能够抑制肿瘤细胞尤其是肿瘤干细胞增殖的小分子化合物，并研究该化合物的作用机制。筛选过程中对于活性化合物分子机制的研究，能够为以后发展成治疗乳腺癌的创新性药物奠定一定的理论基础，在临床应用上具有重要意义。
三、研究方法和手段
1、实验思路：
