研究目的基于目前对银杏二萜内酯的研究,我们可以发现其在抗血小板聚集、抗炎、保护心脑血管等方面均有较高的活性。因为银杏二萜内酯的种类较多,那么不同成分配伍后的作用效果就有所不同,研究其主要成分的不同配伍作用,具有很大的临床指导意义。此实验旨在研究银杏二萜内酯葡胺注射液主要成分配伍,以确定不同配伍条件下的优势作用。
课题背景
据统计,我国约有7000万脑卒中患者,其中缺血性脑卒中约占70%。缺血性脑卒中具有复发率高(17.7%),致残率高(33.3%-44.6%),病死率高(11.4%-15.4%)的特点[1]。血栓形成在心脑血管疾病如不稳定性心绞痛、心肌梗死、短暂性缺血发作和动脉粥样硬化等的发生和发展中起着促进作用。血小板在血管受损部位的血栓形成中扮演着重要角色,特别是动脉血栓及微血管血栓,是导致心脑血管疾病的主要原因[2]。
银杏内酯是银杏叶中一类重要的成分,主要含有倍半萜内酯和二萜内酯[3];已鉴定的二萜内酯类化合物有银杏二萜内酯 A,B,C,J,K,L,M,N,P,Q 等。前期药理研究报道,银杏二萜内酯类化合物具有较好的抗血小板聚集、抗炎、保护心脑血管的活性[4-5],可有效预防治疗心脑血管疾病 [6]。
实验方法
- 治疗给药对大脑中动脉闭塞(MCAO)所致局灶性脑缺血再灌大鼠脑损伤的保护作用
取SD大鼠120只,体重250-300g,按体重性别随机分为12组,每组10只,雄性。分别为假手术组;模型组;金纳多对照组;百裕银杏内酯注射液对照组;银杏二萜内酯葡胺注射液组(GA GB GK组);GA GB组(1:2);GA GK组(15:1);GB GK组(30:1);GA组;GB组;GK组;BB组。假手术组及缺血模型对照组(均给以等容积的生理盐水)。
参考Longa等人的方法[7],采用颈内动脉线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型:大鼠用3%水合三氯乙醛(300mg/kg)腹腔注射(ip)麻醉,仰卧手术台上,颈部正中切口,暴露右侧颈总动脉,向外牵引二腹肌及胸锁乳突肌,由颈总动脉分叉处向头端依次游离,结扎并剪断颈外动脉的分支:枕骨下动脉和甲状腺上动脉。在颈外动脉远端结扎,切断颈外动脉使其主干游离备用。然后分离颈内动脉,用丝线在颈外动脉根部打一松扣,夹闭颈总动脉和颈内动脉。
将渔线(长4cm,直径0.26mm)经颈外动脉主干切口,缓慢向颈内动脉入颅方向推进,当渔线进入颈内动脉后松开颈内动脉上的动脉夹。以颈总动脉分叉处为标记,推进18mm左右时感到阻力,即达到了较细的大脑前动脉内,阻断了MCA的所有血供来源,扎紧颈外动脉根部松扣。2小时后,拔出尼龙线,扎紧动脉残端。缝合皮肤,完成MCAO导致局灶性脑缺血-再灌模型。假手术组大鼠麻醉后,仅暴露颈内外动脉分叉,不闭塞MCA。于复灌后1h尾静脉注射给药,0.2ml/100g体重,每天给药两次,连续给药三天。
MCAO再灌后72h按Bederson的方法对动物的行为缺陷进行分级评分,标准如下:
0分:未观察到神经症状;
