文献综述
1.1研究目的及意义
1.1.1灰葡萄孢的危害
灰葡萄孢（Botrytis cinerea）属于半知菌亚门、葡萄属的一种植物病原真菌，由它引起的灰霉病已经成为了世界性病害，灰葡萄孢的寄主范围十分广泛、危害非常严重。这种病菌腐生性很强，能够侵染约200种植物，如番茄、大豆、黄瓜、草莓等蔬菜、果树以及观赏性植物的各个部位。灰霉病发病时症状为植物幼苗猝倒、落叶、落花和果实腐烂，最后给农业生产等经济方面带来巨大的经济损失。灰霉病是目前我国温室蔬菜生产上最主要的病害之一，一般会造成减产20%-25%，严重时达到40%以上[1]。灰葡萄孢菌源复杂，遗传变异大、适应能力强，属于高风险病菌，很容易产生具有抗药性的病株。植物感染灰霉病后，其花、果、叶、茎均有反应。番茄灰霉病的危害日趋加重，番茄在任何生长阶段中均会发生，果实受害尤为严重。苗期发病时病组织呈褐色，由腐烂逐干枯到表面生出灰色霉层。叶片染病多从叶尖开始，病斑水浸状青褐色，呈“V”字形向内扩展[2]。果实感病后也会软化腐烂，密生灰色霉层。灰葡萄孢的侵染过程可以通过这些阶段：穿透宿主表皮，杀死宿主组织，组织腐烂和孢子形成[3]。因此，灰葡萄孢的分生孢子在病害循环和病害流行的过程中起着重要作用，通过抑制和控制分生孢子的萌发、生长和发育能有效地控制和减轻病害的发生。
1.1.2 课题目的及意义
灰霉病的防治是农业生产上的难题之一，从分子水平上探究灰葡萄孢的致病机制可为灰霉病的防治奠定一定的基础。灰葡萄孢是重要的植物病原真菌。目前，世界各地对灰霉病的防治主要是依赖与化学防治，但是化学农药的使用会易造成环境污染甚至对人类的健康也有一定的影响，因此，现在迫切需要有安全有效的防治措施。
目前灰葡萄孢的全基因组序列已经公布，这为我们从分子水平上了解灰霉病发病机理和侵染机制等提供了资源。本课题主要借助PEG介导的灰葡萄孢表达系统，对灰葡萄孢中Bct3983基因克隆和生物学功能进行了初步的功能分析。建立灰葡萄孢的遗传转化体系，转化获得突变体，观察突变体对菌的生长的影响，并对体系的关键参数和性能指标进行优化和探讨，并进行验证。通过本研究分析了解基因Bct3983在灰葡萄孢生长过程中分子水平上的作用机理，与相关研究进行比较，指出研究中存在的不足以及待解决的问题。为进一步研究灰葡萄孢分生孢子产生机理和灰葡萄孢侵染及致病机理奠定基础。为通过控制分生孢子的产生来控制病害的流行提供新的靶标和思路。
1.2国内外研究概况
1.2.1 灰葡萄孢的研究现状
