腺病毒重组融合蛋白的纯化及免疫原性分析
研究背景:
腺病毒(Adenovirus, ADV)广泛存在于自然界中,是一群具有双螺旋结构的DNA病毒,其相对分子质量为(20-30)times;106 ,属于腺病毒科。腺病毒种类繁多,且大多数具有致病性,是能够导致人类会导致呼吸道和消化道感染的主要病原体之一,严重威胁着人类的健康。因此对腺病毒的检测鉴定具有非常重要的临床意义[1]。
研究目的:
用纯化后的腺病毒重组融合五联体蛋白抗原免疫雌性BALB/c小鼠,取免疫小鼠皮下B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,形成可无限增殖并且能产生特异性单抗的杂交瘤细胞[2]。经反复克隆、筛选得到融合细胞,就可以得到它所分泌的稳定性好、特异性强、效价高的抗腺病毒的单克隆抗体。
研究手段:
感受态细胞的制备(氯化钙法), AD五联体重组质粒的转化, SDS–PAGE 蛋白电泳, AD五联体Ni柱纯化, 动物免疫,ELISA(酶联免疫吸附试验)血清效价测定,制备杂交瘤细胞。
文献综述:
前言:
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