开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、课题背景
荷叶属睡莲科植物(Nelumbonuxifera Gaerth)的叶片，作为一种天然、安全有效的保健食品和药物[[1]]。荷叶提取物有较好的调节血脂功效，有药理[[2]2]研究表明其主要活性组分为荷叶生物碱、黄酮类化合物。黄酮类物质，是大多数氧自由基的清除剂，对治疗冠心病、高血压等疾病有显著效果，并且有抗菌消炎的作用；既可作为心血管疾病的原料药，还可广泛应用于功能食品、保健食品、饮料、食品防腐保鲜剂及化妆品中。
据报道，药食两用材料荷叶具有一定的抗氧化和降血糖活性。并且目前荷叶生物碱[[3]3]、黄酮的需求量不断增加，但是缺少方便有效的分离分析荷叶生物碱和黄酮的方法[[4]4]，限制了对荷叶资源进一步的开发和利用。本课题拟对荷叶水提物黄酮的工艺参数条件进行优化，为荷叶提取物的深入研究和合理开发利用提供参考。同时探讨提取物对DPPH自由基清除率和alpha;-葡萄糖苷酶活性抑制率的影响，为其在功能食品和保健品方面的应用提供参考。
- 要解决的问题
从荷叶的利用率角度出发，研究影响荷叶功能性成分提取效果的主要工艺参数的优化组合，为荷叶的综合利用开发提供依据[[5]5]。
- 可行性分析
本实验以蒸馏水为溶剂，从荷叶中提取有效成分，此方法操作简便。对荷叶水提取物进行定性研究，加入黄酮类物质显色试剂时出现明显显色反应，而加入生物碱沉淀试剂后未出现明显沉淀，可推断荷叶醇提物中的主要的功能性成分为黄酮类物质[[6]6]。
生物类黄酮 （bioflavonoids) 是自然界存在的一大类酚类物质，存在于植物的叶、花、果中的天然色素，因多呈黄色而被称为生物类黄酮，具有抗氧化、抑制脂质过氧化反应，以及预防心血管疾病、抗氧化、防癌等作用[[7]7]。黄酮类化合物(flavonoids)是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮(flavone)结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以游离态(苷元)的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。黄酮类化合物的溶解性因其结构不同而有很大差别，据此可进行提取精制。荷叶中的黄酮类化合物主要有荷叶苷、槲皮素等，主要以苷类的形式存在。黄酮类化合物的苷类一般难溶于乙醚、氯仿和苯等非极性溶剂，而易溶于甲醇，乙醇、乙酸乙酯、水(热水)等极性溶剂。本实验采用标准曲线法，利用芦丁标准品绘制标准曲线。芦丁结构中含有酚羟基和环酮基结构，可与某些金属盐试剂生成有色络合物，在510nm波长处有吸收，可用可见光分光光度计测其含量。本实验热水浸提黄酮后,趁热过滤并定容,采用NaNO2-Al(N03)3-NaOH法进行黄酮含量的测定，于510nm波长处测定吸光度，参照标准曲线得到黄酮含量[[8]8]。
DPPH是一种很稳定的氮中心的自由基，它的稳定性主要来自3个苯环的共振稳定作用及空间障碍，使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。作为一种稳定的自由基，DPPH可以捕获('清除”)其他的自由基。因此通过加入DPPH后观察某一化学反应的速率是否减慢，来作为这一反应是否具有自由基反应本质的指标。由于DPPH自由基在以520nm为中心处具有强烈的吸收，因此在溶液中呈现深紫色，并且在被中和之后会变为无色或浅黄色。DPPH在有机溶剂中是一种稳定的自由基，具有单一电子，故能接受一个电子或氢离子，在波长为517nm下具有最大吸收。有自由基清除剂存在时，DPPH的单电子被捕捉而使其颜色变浅，在最大光吸收波长处的吸光值下降，且下降程度呈线性关系，吸光度水平的降低表明抗氧化性的增加，从而以评价试验样品的抗氧化能力。此抗氧化能力用抑制率来表示，抑制率越大，抗氧化性越强。本实验以蒸馏水作为空白对照，抗坏血酸作为阳性对照，使提取液与DPPH溶液反应,于517m波长处测定吸光度，测定荷叶水提物的DPPH 自由基清除率，以证明其是否具有具有较强的降低羟基自由基、烷基自由基或过氧化自由基的有效浓度和打断脂质过氧化链反应的作用[[9]9]。
目前存在抑制小肠黏膜alpha;-葡萄糖苷酶活性，减少葡萄糖摄入；提高骨骼肌己糖激酶活性，加速葡萄糖磷酸化过程进而提高体内葡萄糖代谢和利用；保护或修复胰岛beta;细胞，促进胰岛素分泌等降血糖机制。大量研究显示，一些多糖类、黄酮类、多酚类、生物碱类等天然产物均能抑制alpha;-葡萄糖苷酶的活性。本实验首先对alpha;-葡萄糖苷酶的酶活力进行测定，再用PNPG绘制标准曲线，用在之前实验中得到的最佳条件提取荷叶中黄酮物质，分别在酸性（pH=4）、中性（pH=7）、碱性（pH=10）条件下观察其对alpha;-葡萄糖苷酶活力的抑制作用[[10]10]。
- 研究方法和内容
4.1研究方法
