小鼠肝脏库否细胞分离及培养方法建立文献综述

 2022-12-25 12:39:18

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

  1. 课题解决的问题

肝脏是肿瘤的好发部位,又是机体巨大的免疫器官,含有丰富的免疫细胞——库否细胞。库否细胞在各种因素所引起的肝损伤及其病变过程中起着至关重要的作用。癌症的免疫治疗是现在的研究热点,其中之一便是研究是否能够通过激活肝脏的免疫活性从而达到预防和治疗肿瘤的目的。因此,需要通过体外实验分离培养库否细胞并研究其活性。

目前国内外存在多种分离培养库否细胞的方法,其中酶消化法最为常用,但是仍然存在一些问题。本课题仍然是以酶消化法进行分离培养库否细胞,通过比较不同的酶消化法所得到的的库否细胞的数量和纯度,对实验方案进行改进,找到最优化筛选,从而找到最佳实验方案,为后续实验奠定基础。

  1. 研究方法和技术路线

动物实验和细胞实验

1.1%的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠,进行肝脏分离,采用不同的酶消化法获得肝脏各种成分细胞。

2.对所获得的细胞进行差速梯度离心清洗从而获得纯的库否细胞。对细胞进行贴壁培养后,进行鉴定,包括库否细胞的数量、纯度、存活率和贴壁率等。

3.比较不同方法之间结果的差异性,进行适当的调整,重复实验。

  1. 论文课题研究进度安排

2019年1月10日-2月28日 确定选题,查阅文献。

2019年3月1日-3月20日 撰写开题报告。

2019年3月21日-4月30日 进行实验,记录实验现象及结果。

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