开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、研究目的:
本课题旨在以HSP65充当蛋白质载体和佐剂以增强STEAP1的免疫原性,制备HSP65与2times;STEAP1186-193的融合蛋白(HHST2)。并以融合蛋白HHST2致敏DC制备DC疫苗,以蛋白疫苗作为对照,探究DC疫苗对前列腺癌的抑制作用。
- 研究手段:
1、融合蛋白的制备
对实验室保藏的重组菌pET28a-His-HSP65-2times;STEAP1186-193进行诱导表达,提取融合蛋白HHST2,并通过亲和层析法纯化。
2、DC疫苗的制备
提取小鼠骨髓中的树突状细胞细胞(DC)并培养,以纯化后的融合蛋白HHST2致敏DC,制备DC疫苗。
3、DC疫苗药效探究
构建C57BL/6J 雄性小鼠RM-1前列腺癌模型,对荷瘤小鼠分组免疫,多种方法进行药效探究:
- 抑瘤率和脏器指数分析;
- HE组织染色分析;
- CCK8法检测脾细胞增殖;
- ELISA检测小鼠血清中细胞因子及抗体含量。
三、文献综述:
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