1.选题的目的及国内研究现状
维生素A（Retinol）和维生素E（Tocopherol）是机体维持正常代谢和机能必需的脂溶性维生素 ［1］ 。维生素A又称 视黄醇，具有促进机体生长、维持表皮完整、生殖、骨骼及视觉等功能;维生素E又称为生育酚，其中以alpha;-生育酚的生物效应最高，具有促进生育、抗衰老的作用。由于 两 维生素在外界环境中不稳定，易受光、氧等影响而被氧化破坏，影响因素较 ，因此寻找合适的测定方法同时测定维生素A和E仍然是目 检验技术的难点。目前的国家卫生标准方法测定时间长、方法繁琐，可能导致样品中脂溶性维生素损失，回收率也不高。食品中维生素A和E的测定方法报道较少，主要有荧光法、HPLC等 ［2～5］ 。荧光法有诸多不足 ［2］ ;正相HPLC因溶剂纯度要求高、价贵，且要接触较多对人体有害的有机溶剂，一般尽量避免使用;反相HPLC测定法 ［3～5］ 样品经提取后，涉及到多次蒸发、溶解等步骤，前处理较麻烦、费时，易造成待测成份的破坏，导致测定结果偏低，灵敏度不高，对样品种类也有限制。本文建立了一种快速、灵敏、准确的反相高效液相色谱法同时测定食品中维生素A（retinol）和alpha;-生育酚（alpha;-tocopherol）的方法，样品处理简单，方法简便易行。并用建立的方法对几种食品中维生素A和E进行了测定，取得较好的结果。 2 材料与方法1.实验器材及实验前准备 1.1 主要仪器和试剂 日本岛津LC-10A高效液相色谱仪，二极管阵列检测器;色谱柱:反相C 18 柱，10cm2.1mm，5mu;m（美国Supleco公司）;超声波清洗器;N-EVAP TM 112氮气吹扫仪;LXJⅡ型离心沉淀机，0～4000r/min;0.45mu;m有机系针筒式微孔滤膜过滤器;Milli-Q plus超纯水系统（美国密理博公司）;维生素A和alpha;-生育酚标准品，含量gt;99.0%（美国sigma公司产）。试剂除注明外均为分析纯。无水乙醇经脱醛处理后使用，具体操作方法为:取1.5g AgNO 3 用少量水溶解，倒入500ml无水乙醇中，加2g NaOH，摇匀，避光放置2d，隔半天摇1次，滤纸过滤后，滤液用旋转蒸发仪蒸馏，弃去最初和最后各50ml馏出液。
1.2 标准溶液的配制 储备液:精确称取维生素A和维生素E标准品用脱醛无水乙醇溶解使浓度分别为1.0mg/ml和0.10g/ml，储于-20℃冰箱中。工作液:测定前用脱醛乙醇稀释维生素A和维生素E储备液，使浓度分别为100mu;g/ml和1mg/ml。应用液:测定时先用紫外分光光度法标定其准确浓度，用脱醛乙醇将工作液稀释成一定浓度的混合标准系列溶液。 1.3 仪器条件 流动相甲醇:水=93 7，流速0.4ml/min，柱温40℃，波长扫描范围:210～370nm，检测波长分别为325nm（Vitamin A）、294nm（Vitamin E）。 1.4 样品来源 随机抽取深圳市各 超市市售奶粉、奶粉伴侣、米粉、婴幼儿葡萄糖、保健饮料和复合维生素片等样品。
2实验方法 2.1 样品制备与处理 准确称取5.0～10.0g均匀化样品，置于200ml皂化瓶中，加40ml含16g/L焦性没食子酸的无水乙醇溶液，搅拌均匀后，加入20ml1 1KOH溶液，摇匀，避光80℃水浴中回流30min，不时摇匀，使皂化完全，皂化后立即置于冰水浴冷却;冷却后将样品转移到250ml分液漏斗中，用70ml石油醚洗2次皂化瓶，洗液并入分液漏斗，振摇萃取静置分层，收集石油醚层于另一分液漏斗，再用30ml石油醚提取水层，合并石油醚层。用去离子水反复洗分液漏斗中石油醚，直至用pH试纸检查水层不显碱性。将石油醚提取液经无水硫酸钠滤入100ml离心管中，在40℃水浴下氮气流吹干后迅速用流动相溶解定容至1.0ml，过0.45mu;m微孔滤膜后，进样5mu;l进行测定。整 操作过程严格避光。 2.2 标准曲线的绘制 用脱醛乙醇将工作液稀释成混合标准系列溶液，使浓度分别为维生素A为（mu;g/ml）:0.10、0.20、0.50、0.70、1.0，维生素E为（mu;g/ml）:1.0、2.0、5.0、7.0、10.0。将混合标准系列溶液进样5mu;l进行测定。用峰面积比对浓度绘制标准曲线。 2.3 样品测定及计算 根据样品测定的色谱峰面积，在相应标准曲线查出对应的含量，结合所取的样品质量和定容体积计算样品相当的含量。
3.研究及写作计划
3月1号3月15号 选定课题及收集相关资料
3月15号4月1号 撰写开题报告及开题
4月1号4月15号 收集资料，开展研究
4月155月1号 深入研究，形成论文初稿
