一、研究背景和文献综述
ABCA1是一种血浆膜蛋白，主要功能是通过促进过量胆固醇和磷脂流出到无脂或少脂的载脂蛋白AI来调控细胞的胆固醇和磷脂稳态（1,2,3）。研究发现白细胞胆固醇含量的改变可影响其功能：①ABCA1缺失的白细胞胆固醇含量增加的同时迁移浸润的能力也增强（4,5,6）；②ABCA1缺失的巨噬细胞对LPS刺激应答反应变强（7-9）。有趣的是，最近有证据显示巨噬细胞ABCA1也具有直接抗炎功能，且这种抗炎功能独立于它的脂质转运功能（10）。
甲状腺功能减退是一种甲状腺不能产生足够的甲状腺激素来维持机体正常代谢的状态。大多数是由碘缺乏或自身免疫介导的。在自身免疫性甲状腺炎中，抗甲状腺过氧化物酶抗体和甲状腺球蛋白引起了甲状腺滤泡逐渐破坏。自身免疫性甲状腺炎的特征还有白细胞（主要是T淋巴细胞）浸润甲状腺组织 （11）。我们认为ABCA1可通过影响T细胞尤其是CD4 T细胞的功能来调节自身免疫性甲状腺炎的发展。
本实验拟通过猪甲状腺球蛋白（Thyroglobulin，Tg）致敏小鼠制备自身免疫性甲状腺炎模型，观察ABCA1CD4-/ CD4-与野生型小鼠T细胞应答的差异，来探究ABCA1在调控CD4 T细胞功能中的作用。本研究不仅将加深我们对ABCA1调控CD4 T细胞功能的理解，也将为治疗包括自身免疫性甲状腺炎在内的自身免疫性病的预防与治疗提供新的靶点和思路。
二、研究内容和技术路线
（1）制备并鉴定CD4 T细胞特异性的ABCA1基因敲除小鼠：
利用loxp-cre重组原理，将ABCA1loxp/loxp与CD4-cre小鼠交配，来制备ABCA1 CD4-/ CD4-小鼠。分离小鼠脾脏中CD4 T 细胞和CD11b 单核细胞，利用Q-PCR和Western-blot确定CD4 T 细胞上ABCA1表达的特异性缺失。
- 猪TG抗原制备：分支杆菌浓度4mg/mL的弗氏佐剂（CFA，购于Sigma公司）与1mg/mL猪TG抗原1:1混匀
- 小鼠致敏实验（共计4周）：
①Day1：称重后禁食4h，尾静脉采血100uL，于4000r/min离心10min后取血清
②Day2：于小鼠颈后和尾根处皮下各注射100uL乳状猪TG抗原，喂食0.15% NaI溶液
③2周后二次致敏，方法同上，二次致敏后再过2周进行脾细胞增殖，每周称重并记录。
