丙二醇中乙二醇的含量测定方法学验证文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

拟研究或解决的问题：奥硝唑注射液在实际生产中，添加了丙二醇作为稳定剂。由于工业上采用环氧丙烷加压水合的生产工艺，致使产生乙二醇等杂质。然丙二醇和乙二醇有引起肾脏障碍的危险，尤以乙二醇的代谢产物毒性较高，可引起肾损伤和代谢性酸中毒。为了确保注射剂的安全有效，质量可控，依照中国药典2015征求意见稿，现拟定本课题，对辅料丙二醇中乙二醇进行含量测定的方法学验证。

采用的研究手段：本课题拟通过气相色谱，FID为检测器，按照药典附录中方法学验证要求，对丙二醇中乙二醇含量，进行线性，精密度，重复性，中间精密度，稳定性，回收率等验证，从而保证丙二醇乙二醇实现较好分离，并测出其含量。

文献综述：

摘要：

注射用奥硝唑是以奥硝唑为主药，丙二醇，盐酸为辅料的注射剂^[1]。本文通过从奥硝唑注射液具体工艺着手，分析乙二醇丙二醇性质异同，在了解国内外关于二者含量测定所用方法的基础上，明确本课题拟采用的含量测定方法及方法学验证的具体内容。

正文：

奥硝唑在乙醇，氯仿，酸性溶液（如冰醋酸，盐酸）中易溶，但在水中微溶。实验发现奥硝唑pH对其溶解度有较大影响，^[2]生产中用盐酸调节pH和提高温度能增加奥硝唑在水中溶解度，灭菌后含量下降和有关物质升高，加入丙二醇作^[3]为稳定剂。^[4]而因丙二醇的环氧丙烷加压水合的生产工艺^[5]，不可避免的产生了乙二醇等杂质，易对人造成肾毒性，故含量必须控制。

丙二醇别名甲基乙二醇，为无色粘稠的吸水性物体，与水，乙醇等多种有机溶剂互溶，分子量76.09，沸点188.2℃，熔 点－59℃，相对密度（水=1）：1.04，含两个醇羟基，极性较强。乙二醇，无色无臭，甜味液体，能与水，丙酮互溶，但在醚类中溶解度较小，极性稍强于丙二醇，沸点197.4℃，熔点-13.2℃，相对密度（水=1）:1.12^[6]。二者均为中沸点的水溶性溶剂，且羟基在水中均能形成氢键。^[7]

对于气相色谱，由于样品在气相中传递速度快，因此样品组分在流动相和固定相之间可以瞬间地达到平衡。另外加上可选作固定相的物质很多，因此其为一个分析速度快和分离效率高的分离分析方法。近年来采用高灵敏选择性检测器，使得它又具有分析灵敏度高、应用范围广等优点。^[8]

目前国内在丙二醇的生产工艺中，对主成分测定的常规方法是折光法和化学法。方法的局限性在于只能测定丙二醇的含量而无法了解其他组分的含量。而用气相色谱法对丙二醇，乙二醇，二丙二醇及异构体的分析工作，目前报道较少，国内报道的方法采用Chromosorb-101为固定相，采用FID检测器，氢气作载气，对样品中的丙二醇未进行峰处理，所以存在耗材昂贵，最小检出浓度高及丙二醇及杂质峰不兼顾等不足。国外文献报道采用PEG20M固定液涂于Chromosorb-GDMCS载体上进行分离。此法比较简便，但不能分离丙二醇中少量乙二醇。^[9]丙二醇乙二醇，由于二者性质较为相似，故分离检测较为关键（工艺上有用非均相共沸精馏分离乙二醇及1,2-丙二醇^[10],)。另有关文献中有用无水乙醇提取二者，并采用 HP-5 石英毛细管柱和INNOWAX石英毛细管柱进行测定, 结果显示INNOWAX 色谱柱中乙二醇、1,2-丙二醇和1,3-丙二醇的峰形均优于HP-5石英毛细管柱^[11]）。^[12]

为此必须要建立一个有效，快速的测定丙二醇及其中乙二醇杂质的方法。乙二醇作为杂质能否得到合理有效的控制直接关系到药品的质量可控。为使杂质测量结果准确，可控，必须对所采用分析方法的科学性，准确性和可行性进行验证以充分表明所采用的杂质分析方法能够满足有效分离，检出杂质及对杂质进行准确定量的目的要求。^[13]

杂质检查方法验证的内容应根据检测目的，结合所采用分析方法的特点确定，可以包括专属性、线性、范围、准确度、精密度、检测限、定量限、耐用性和系统适用性等。一般用于限度试验的方法验证侧重专属性和检测限，用于定量试验的方法验证强调专属性、准确度和定量限。^[14]

本课题研究方法拟为按照2015版药典征求意见稿。虽然具体的方法和思路已经存在，但具体展开实验时决不能按部就班。应根据实际存在的问题进行方法完善。

在2015版药典征求意见稿中乙二醇者含量测定采用外标法，以（6%）氰丙基苯基-（94%）二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱为色谱柱，氢火焰离子化检测器，氮气为载气，氢气为燃气，含量不得超过0.02%。^[15]

有文献采用国产高分子多孔微球口 X 一101 为固定相, 氢火焰离子化检测器, 1 , 4 一丁二醇为内标, 对环氧丙烷加压水合制丙二醇工艺物料中全组分进行测定, 对主组分丙二醇的色谱峰进行衰减处理, 使主组分峰与杂质峰兼顾, 采用微机数据处理工作站处理数据。 所以在具体实验开展后，关于现有条件（检测器，固定相，检测温度，提取剂等）进行验证，且在必要的情况下需实现条件的优化。