开题报告
- 研究目的
迄今，缺血性心脏病已成为全人类的头号致死元凶。心肌缺血再灌注（Myocardial ischemia reperfusion, MIR）损伤是重要的损伤类型，也是心血管手术和心肌梗死后发病率与致死率的首要原因，尚无有效的治疗手段。因此，寻找有效的防治MIR的靶点和药物已成为研究的热点和难点。II型非肌肉肌球蛋白(Nonmuscle myosin II)是肌球蛋白超家族中的一员，与actin结合构成细胞中的分子马达。近年来，对NMMHC IIA基因及蛋白功能的研究也日益增多。现已发现NMMHC ⅡA在遗传性疾病、肿瘤、血栓、肺损伤等病理过程中均发挥着重要的作用。Blebbistatin是一种具有细胞通透性的myosin II的抑制剂，可抑制ATP酶的活性，具有高度的亲和性和选择性。研究报道Blebbistatin能够通过抑制myosin IIA-actin的相互作用抑制线粒体裂分进而改善心肌缺血再灌注损伤，但关于其在MIR损伤中的炎症和氧化应激的作用未见更多报道。本项目以NMMHC IIA为出发点，探讨Blebbistatin在MIR所致心肌损伤的作用以及炎症和氧化应激的影响，以期为丰富心肌缺血再灌注损伤的病理机制提供参考依据，也为防治心肌缺血再灌注损伤提供新的靶标和策略。
拟研究或解决的问题
1、对心肌缺血再灌注损伤模型小鼠给予Blebbistatin后，考察心肌损伤相关指标变化；
2、对心肌缺血再灌注损伤模型小鼠给予Blebbistatin后，考察炎症和氧化应激相关指标变化。
三、研究手段及内容
- 通过查阅文献和总结课题组前期实验情况，采用冠状动脉结扎手术（结扎30 min，再灌注24 h）制备心肌缺血再灌注损伤动物模型；
- 缺血后20 min，进行腹腔注射Blebbistatin 5 mg/kg，24 h后取材进行相应实验；
- TTC染色观察心脏梗死情况；HE和Masson染色观察心脏病理结构变化；检测血清中心肌损伤相关指标LDH和CK；检测血清中炎症相关指标MPO、TNF-alpha;、CRP；检测血清中氧化应激相关指标MDA；WB检测心肌组织中NMMHC ⅡA的表达。
- 成果形式
成果将以基础研究论文的形式呈现。
- 课题进度
第一阶段（2020年3月）：熟悉实验室规则，进行文献查阅整理，准备开题报告；
第二阶段（2020年4-5月）：学习的基本实验操作，熟练掌握小鼠冠脉结扎的手术操作，进行主体实验研究；
第三阶段（2020年6月）：总结归纳实验结果，撰写毕业论文，进行毕业答辩。
