开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
- 拟研究或解决的问题
阐明vitamin D类药物对NSCLC吉非替尼耐药的抑制作用,为逆转NSCLC EGFR-TKI耐药提供新策略。
二、研究内容
2.1考察vitamin D对PC-9/GR和H1975细胞活力和凋亡的影响。
培养PC-9/GR和H1975细胞,分别用1,25(OH)2D3和EB 1089作用于PC-9/GR和H1975细胞,MTT检测细胞活力;收集细胞,用Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡;
2.2考察vitamin D对PC-9/GR和H1975细胞增殖的影响
培养PC-9/GR和H1975细胞,分别用1,25(OH)2D3和EB 1089作用于PC-9/GR和H1975细胞,提取细胞蛋白,western blot检测C-myc和cyclin D1的表达。
2.3观察1,25(OH)2D3和EB 1089分别联合吉非替尼对PC-9/GR和H1975细胞活力、增殖及迁移的影响
培养PC-9/GR和H1975细胞,单独1,25(OH)2D3和EB 1089或联合吉非替尼作用于PC-9/GR和H1975细胞,MTT检测细胞活力,克隆形成及Edu-594染色观察细胞增殖,划痕实验观察细胞迁移
三、研究方法
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