开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、实验背景及目的
血管内皮细胞为覆盖于血管内膜表面的单层扁平或多角形的细胞，对调节和维持血管功能起着至关重要的作用。血管内皮损伤是导致心血管功能障碍的主要原因，而炎性反应和氧化应激是引起内皮细胞损伤的重要因素 [1]。活化的微血管内皮细胞中，异常的糖酵解代谢导致线粒体膜电位升高，促使线粒体活性氧产生，打破了体内氧化与抗氧化作用的平衡，阻断内皮细胞增殖，从而引起内皮损伤。此外，炎性因子（IL-1beta;、IL-6、TNF-alpha;）的释放也会激活微血管内皮细胞，导致内皮细胞因子释放、细胞收缩、血管通透性增强，引起血栓炎性反应[1, 2]。
红花（Carthamus tinctorius L.）具有活血通经，散瘀止痛等多种功效，常用于胸痹心痛、跌打损伤、慢性支气管炎等的治疗。红花的主要活性成分羟基红花黄色素A（HYSA），具有抗氧化、抑制炎性反应和防止血脑屏障破坏保护脑组织稳态的作用。本实验以脑微血管内皮细胞为研究对象，通过建立苯肼诱导的斑马鱼血栓模型和t-BHP诱导的氧化应激模型，旨在考察HSYA对氧化应激和炎性反应的调控作用，以及对微血管内皮细胞的保护作用。
- 研究内容和研究手段
1.建立苯肼诱导的斑马鱼模型
选择受精后2dpf（days post fertilization，受精后天数）发育正常的斑马鱼幼鱼，建立苯肼诱导的斑马鱼血栓模型，分别考察红花单体化合物（HSYA、6-羟基山奈酚-3-氧芸香糖苷-6-氧葡萄糖苷、绿原酸、山奈酚-3氧芸香糖苷和6-羟基山奈酚-3,6,7-三氧葡萄糖苷）对斑马鱼血栓模型的保护作用。实验分组设置为：空白对照组、模型组、药物干预组，培养24h后用邻联茴香胺染色液染色，于正置显微镜下对其心脏部位进行拍照并保存。
2.CCK8法测定细胞活力
待细胞长至融合状态时，接种于96孔细胞培养板，实验分组设置为：空白对照组、HYSA组、t-BHP组、t-BHP HYSA组。培养过夜后，给予相应的药物和刺激剂，使用CCK8检测试剂盒，用多功能酶标仪测定吸收波长为450 nm处的吸光度值。
3.活性氧（ROS）的测定
待细胞长至融合状态时，接种于48孔细胞培养板。实验分组设置为：空白对照组、t-BHP组、t-BHP HYSA组。待细胞长至60-70 %融合度时，给予相应的药物和刺激剂，使用活性氧检测试剂盒，用多功能酶标仪在激发光488 nm，发射光525 nm处测定细胞中ROS荧光强度。
