肥胖是一种发病率逐年增加的常见慢性疾病，它是众多疾病的重要诱因，尤其是心血管类疾病[1-3]。西布曲明曾是减肥药市场上几种对肥胖症有良好疗效的药物之一。然而，由于其有潜在的副作用，现已在多个国家被撤市[4-9]。研究者对其结构进行改造，通过将西布曲明的活性代谢物M2与异亮氨酸进行缩合反应得到了D-异苯环戊胺，现已获得中国专利[10,11]。在该药前期研究中，小鼠静脉注射实验表明D-异苯环戊胺的LD50比西布曲明更高，安全性更好；营养性肥胖模型大鼠灌胃实验表明D-异苯环戊胺具有与西布曲明相当的减肥效果[12]。因此，研究者们正针对D-异苯环戊胺这一潜在的减肥药新品种从各个方向进行深入的研究。
本课题组对D-异苯环戊胺在大鼠胆汁、尿液和粪便中主要代谢物的结构鉴定结果表明，其在大鼠体内主要代谢方式为羟化、脱氢和N-氧化。然而，该化合物的代谢及主要代谢物在整个排泄中的比例尚不清楚。作为初步研究，拟通过对其原型在主要排泄方式中的累积排泄率推知该化合物代谢过程及主要代谢物在排泄中的重要性，从而对其在大鼠体内的代谢行为有个全面的认识。
该化合物结构中含有一个伯氨基，容易在酸性流动相及ESI-MS中产生正离子响应。因此，拟应用LC-ESI-MS在正离子模式和SIM检测方式下建立D-异苯环戊胺在大鼠胆汁、尿液和粪便中的定量测定方法。实验中，收集动物单次给药后一段时间的胆汁、尿液和粪便样品，对样品进行相应前处理并测定含量。最后，计算各个途径下该化合物的累积排泄率并进行加合以评价原型的总累积排泄率。
具体的实验材料及实验设计如下：
1. D-异苯环戊胺给药药剂的制备
给药溶液为4 mg/ml的D-异苯环戊胺生理盐水溶液（约含3 %乙醇和0.3 %吐温-80）。按制备10 mL给药溶液将制备方法描述如下：称量40 mg D-异苯环戊胺至10 mL玻璃离心管中，加入300 mu;l乙醇，涡旋3 min使其充分溶解，加入4.7 ml含0.6 %吐温-80的生理盐水溶液，涡旋1 min，即得到4 mg/mL的D-异苯环戊胺生理盐水给药溶液。
2. 动物给药及胆汁、粪便和尿液样品的采集
12只大鼠随机分成两组，每组6只，雌雄各半。其中一组给药并收集胆汁样品。另一组给药并收集粪便和尿液样品。
