开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）一 主要研究目的及意义跨膜丝氨酸蛋白酶2（Transmembrane serine proteinase 2,TMPRSS2）是Ⅱ型丝氨酸蛋白酶（TypeⅡtransmembrane serine protease,TTSPs）家族的成员之一。
TMPRSS2能够水解H1N1、H3N2、H7N9等流感病毒的血凝素蛋白（Hemagglutinin,HA），以及SARS-CoV、SARS-CoV-2、MERS-CoV、HCoV-229E、HCoV-OC43等冠状病毒的棘突蛋白，对它们感染细胞起着至关重要的作用。
TMPRSS2介导的上述流感病毒包膜蛋白水解，是病毒进入细胞的关键步骤之一。
基于毕赤酵母酵母展示技术表达TMPRSS2，可为后续基于配体垂钓筛选中药抑制剂及活性成分提供基础，可能获得有希望的广谱抗流感、抗冠状病毒药物。
二 拟研究或解决的问题1.完成表面展示跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS2毕赤酵母（Pichia pastoris）工程菌的构建；2.完成表面展示跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS2的酶学性质检测；3.探索从中药中筛选能够抑制TMPRSS2活性的先导化合物。
三 拟采用的研究手段及内容1 文献研究法：通过图书馆、互联网、电子资源数据库（知网、万方等）及其他途径查阅大量文献，了解跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS2的相关研究进展，掌握毕赤酵母表达系统及酶学相关知识，理清课题研究内容，为实验的设计奠定理论基础。
2 实验研究法：基于发酵工程、酶工程的理论基础，将跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS2合成酶基因整合到质粒构建成FL-pPICZalpha;A-TMPRSS2重组质粒，并将其重组于毕赤酵母染色体中，完成表面展示跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS2毕赤酵母工程菌的构建，筛选出阳性转化子，利用荧光光度法检测酶学性质。
四 成果形式成果将以基础研究论文的形式呈现。
五 研究计划2021年3月1日3月20日进行文献查阅整理，撰写开题报告与开题；2021年3月21日3月30日设计实验方案，准备实验材料；2021年4月01日5月20日进行主体实验研究，形成论文初稿；2021年5月21日5月28日论文修改、定稿、打印；2021年5月31日6月10日答辩六 文献综述跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS2毕赤酵母工程菌的构建摘要：[目的]利用毕赤酵母分泌表达跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS2。
