- 研究内容
不同生化来源的肝素钠粗品以及脑垂体后叶的种属鉴别。
- 实验路线
(1)粗品肝素钠残留核酸的提取;
(2)脑垂体后叶残留核酸的提取;
(3)测定核酸浓度;
(4)引物设计;
(5)PCR检测。
三、研究难点
除肝素钠的条件:传统的纯化和富集DNA的常用方法都不能有效的去除肝素钠,但若在鉴定方法中采用肝素酶Ⅰ对肝素钠供试品溶液进行酶解,则能有效的去除肝素钠对后续PCR扩增的影响,且酶解完后的溶液并不需要再对DNA进行提取和纯化,而直接可以作为后续PCR反应的模板,过程简单便捷。另外,绝对荧光定量PCR与相对荧光定量PCR相比,能更加稳定详细地精准分析出各组分及污染物,同时,PCR法也可用于测定脑垂体后叶的特异性核酸序列。
现有特异性核酸序列的条件:选择线粒体DNA中的特异性片段作为扩增目标序列,物种的线粒体DNA序列可在美国国立生物技术信息中心网站(NCBI)的基因数据库(Genbank)中查询到。
- 遇到的问题和解决措施
遇到的问题:
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