松材线虫体内病毒RNA提取及序列分析
摘要：松材线虫病亦称松树萎蔫病或松树枯萎病，是松树上的一种毁灭性传染病，被许多国家列为检疫对象。现阶段，在对研究松材线虫体内病毒方面国内外都是缺乏阶段，在发现松材线虫病毒颗粒后对其RNA的序列分析有效判断所属病毒，对该病有更深一步的探究，也是对全世界松树感病原因的进一步分析。
关键词：松材线虫、松材线虫病、线虫、病毒、RNA
- 松材线虫研究概况
1.1松材线虫的介绍
松材线虫是国际上公认的重要检疫性有害生物。它能引起松材线虫病，使感病植物迅速枯死，且传播蔓延极快，一旦发病将造成极为严重的损失，已有40多个国家将其列为检疫对象【1-2】。目前，对松材线虫病的研究主要涉及病原松材线虫的生物学特性、寄主的感病性、线虫的传播媒介等，但该病的防治和控制工作进展缓慢【3-4】，而对其所造成的环境经济影响的研究几近空白【5】。
1.2松材线虫的分布
松材线虫病分布在美国、加拿大、韩国等多个国家【6】。在这些国家中，虽然病害发生较普遍，但均未引起明显损失。日本自1905年有记载以来，病害几乎席卷全国，疫区面积达65万hm2，占松林总面积的25%（1981年止）。日本的黑松、赤松、琉球松已所剩无几，损失极其严重【7】。松材线虫引发的松树萎蔫病已经成为全球性病害，其中在日本、中国和韩国发生最为严重【8】。
我国也不例外，1982年秋，在南京紫金山中山陵黑松上首次发现该病害，当时仅有几十株病死木，该病先后在广东深圳（范军详，1987）、安徽马鞍山与和县（1988）、山东长岛（1990）、浙江象山（1991）、上海（1999）（2003年已根除）、湖北恩施（2000）等地发生；2001年又分别在重庆长寿区、福建三明发现（国家林业局，2002）；2003年在江西赣州、湖南郴州和贵州遵义发现（国家林业局，2004）；2004年又在云南德宏州发现（国家林业局，2005）。至2007年，全国已有14个省（自治区、直辖市）的185个县区发生松材线虫病。2018年2月国家林业局最新公告显示我国松材线虫病疫区已经覆盖有辽宁、江苏、浙江、安徽、福建、江西、山东、河南、湖北、湖南、广东、广西、四川、贵州、陕西部分地区【9】。现疫区面积约有33.3万公顷，已造成经济损失数千亿元。
1.3松材线虫的症状特点
