产β-半乳糖苷酶重组菌株发酵条件优化文献综述

 2022-08-03 16:16:43

产beta;-半乳糖苷酶的重组菌株的发酵条件优化

摘 要

beta;-半乳糖苷酶是经常用于乳制品生产的酶之一，用来为乳糖不耐症的人提供解决办法，提高乳制品的质量等，同时也在基因工程方面有所应用。本文主要以大肠杆菌BL21为实验原料，通过改变在培养菌种时的条件，来寻找更优的培养环境，提高beta;-半乳糖苷酶的酶活或菌种的生产效率。

邻硝基苯酚-beta;-D-半乳吡喃糖（oNPG）是一种白色粉末，溶于水为无色液体，通过与beta;-半乳糖苷酶反应可以水解生成邻硝基苯酚（oNP），在液体中为黄色且浓度越高颜色越深，通过在OD420测量oNP的浓度，来计算beta;-半乳糖苷酶的活性。

当大肠杆菌活化后，在TB培养基中摇瓶培养，每24小时测量一次酶活，三天内酶活分别为2.33、5.07、10.58U/mL。然后在TB中加入甘氨酸进行各种条件的发酵优化，并测定菌浓与酶活力值，每次选择最高值进行下一次发酵条件改变，最终获得最高值。

本实验在培养温度、IPTG浓度、IPTG加入时间、甘氨酸浓度、诱导剂种类五个条件中选取不同的条件进行培养，最终在所有测量条件中，在30℃，诱导剂为IPTG，浓度150mu;L，并在加入TB培养基后6小时后加入，TB培养基中甘氨酸浓度为10g/L时，beta;-半乳糖苷酶的活性最高。最终酶活力为70.75U/mL。

关键词：beta;-半乳糖苷酶；发酵优化；重组菌株；

Optimization of fermentation conditions for recombinant strain producing beta;- galactosidase

ABSTRACT

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