文献综述
一、背景介绍牛津大学的Howarth Mark团队在革兰氏阳性菌酿脓链球菌Streptococcu spyogenes的纤连蛋白CnaB2中分离了带有Asp117的肽段SpyTag和带有Lys31的肽段SpyCatcher。
其中,Lys31能够和Asp117侧链自发地进行共价结合[1-2]。
该反应能够在短时间内完成,并且不需要任何特异性酶或离子进行催化,这种异肽键一经形成很难发生逆反应[3-4]。
自从分子超级胶肽标记系统SpyTag/SpyCatcher发现以来,蛋白质环化[5-6]、酶组装[7-8]、蛋白质纯化[9]和固定化[9-10]等技术在蛋白质之间或蛋白质自身末端之间形成强相互作用的异肽键方面获得了新的应用。
随着蛋白质设计技术的发展,许多品种的SpyTag/SpyCatcher,例如SpyTag/KTag[11]、SpyTag002/SpyCatcher002[12]、SpyTag003/SpyCatcher003[13]等被构建并应用于不同领域。
近年来,表面电荷改造已经应用于蛋白质设计[14],使用SpyCatcher的一个电荷突变体SpyCatcher(-)与产量可调的刺激来反应SpyTag,是一个内在无序的蛋白质[15]。
高电荷蛋白在其表面残基中具有大的负电荷或正电荷。
高电荷密度可使蛋白质具有许多显著特征,包括穿透哺乳动物细胞的能力[16]、异常抗性[17]、刺激反应性[18]、蛋白质自组装等。
值得注意的是,超负荷蛋白可以与相反的带电蛋白质结合,导致它们聚集在一起[19]。
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