开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
研究表明，在不同的肝病患者体中，维生素D的表达量都存在不同程度的缺乏，维生素D在肝病的发生、发展过程中发挥了一定作用。维生素D除具有对钙磷代谢起调节作用外，其生理意义还包括免疫调节作用、抗感染病作用、抗肿瘤作用等。
肝纤维化（Hepatic fibrosis）是多种慢性肝病的共同病理过程，其特征是肝损伤后的胞外基质累积，尤其是胶原蛋白过度沉积。肝纤维化受许多因素的影响，包括TGF－beta; 介导的信号转导通路、PDGF受体介导的信号转导通路、TNF-alpha; 介导的信号转导通路 、ECM、氧化应激等。
研究证实，肝星状细胞（Hepatic stellate cells, HSCs）是纤维化肝脏内细胞外基质的主要合成来源。肝星状细胞在生理状态下位于肝索和肝窦壁之间的Disse间隙内，呈长圆形，具有多数带分支的长突起。肝星状细胞在被激活后转化为肌成纤维细胞，形态改变，表达多种细胞因子及受体大量增殖，大量合成细胞外基质，表达平滑肌alpha;-肌动蛋白(alpha;-SMA)，并具有收缩功能。肝星状细胞在肝纤维化的发生、发展过程中发挥着关键作用，是肝纤维化形成的中心环节。因此，抑制肝星状细胞的活化一直是肝纤维化治疗研究的热点。
维生素D与维生素D受体（Vitamin D receptor, VDR）结合后,不仅发挥经典的钙磷调节作用,还具有调节细胞增殖、调节免疫及抑制细胞坏死、诱导肿瘤细胞分化、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤浸润和转移等非钙调节作用。近期研究发现维生素D受体参与了肝纤维化的发生发展过程。肝星状细胞高表达VDR，而在肝实质细胞中几乎不表达。VDR敲除小鼠能够自发形成肝纤维化，并且在相关文献也报道给予CCl4诱导的肝纤维化模型小鼠VDR激动剂后能够控制肝纤维化的发生，提示VDR在肝纤维化发生发展过程中扮演着重要的角色。
本项目在基于VDR作用机制的研究基础上，拟设想在我们的化合物库中筛选出特异性靶向VDR的新型小分子化合物，以此来更加有效地抑制肝星状细胞的活化，从而干预肝纤维化的发生发展。
以下是我们拟采取的研究方案：
- 初步筛选对肝星状细胞活化起到抑制作用的化合物
采用PolarScreen Vitamin D3 receptor(VDR) competitor assay，检测化合物对于VDR的结合能力。以卡泊三醇为阳性对照，其结合率定为100%，我们的化合物以此为参照，进行结合率的测定。
体外培养肝星状细胞（LX-2），在培养过程中加入不同浓度的化合物，采用CCK-8或MTT实验检测化合物对细胞增殖能力及活性的影响，确定化合物对细胞产生毒性作用的下限浓度。
在培养LX-2细胞的过程中加入TGF-beta;（1 ng/ml）诱导LX-2细胞活化，同时给予化合物，采用ELISA，Realtime-PCR和western blot技术检测纤维化标记Collagen I，alpha;-SMA和TIMP1的含量，确认能够对LX-2细胞活化起到显著抑制作用的化合物。
