开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
胆汁淤积综合征是指肝内外各种原因造成胆汁形成、分泌和排泄障碍，使胆汁流无法正常流入十二指肠而在肝脏和血清中蓄积，血清中碱性磷酸酶（ALP）、gamma;-谷氨酰转肽酶（gamma;-GT），胆汁酸和胆固醇水平升高，临床表现为黄疸、乏力、瘙痒和尿色加深等[1]。在肝脏中蓄积的胆汁酸具有疏水性，它们可能会引起膜损伤和膜功能受损。并且胆汁酸的保留下调了新的胆汁酸合成，这导致胆汁盐池和肠肝再循环的减少。此外，胆固醇的保留会引起细胞膜的胆固醇含量升高，从而降低其流动性并损害完整膜蛋白的功能，胆汁淤积若长期得不到改善，病情进展后可出现高胆红素血症，甚至导致肝衰竭或死亡[2]。
胆汁酸是由肝脏中的胆固醇合成的两亲性分子，是胆汁中的主要成分。肝细胞分泌胆汁酸和其他胆汁性化合物会产生胆汁流动，有助于消除内源性化合物和代谢产物，例如胆红素和激素，以及包括药物在内的外源物[3]。在正常健康的生理状态下，胆汁酸的合成代谢呈动态平衡，在细胞和消化道内的浓度维持在一定范围内，胆汁淤积的常见发生机制是由于胆汁酸的合成、转运、代谢失衡，胆汁酸稳态被破坏。胆汁酸由胆固醇经肝脏中胆固醇7alpha;-羟化酶（CYP7A1）代谢生成，产生两种初级胆汁酸，胆酸（CA)和鹅去氧胆酸（CDCA）。CA的生物合成还涉及甾醇12alpha;-羟化酶（CYP8B1），它决定了CA和CDCA的生成比率[4]。初级胆汁酸随胆汁流入肠道，在促进脂质吸收的同时受到细菌作用转变为次级胆汁酸，肠内的胆汁酸有约95％被肠壁重吸收，经门静脉回到肝脏[5]。将胆汁酸摄取入肝细胞的过程主要涉及基底外侧转运蛋白，包括钠离子/牛磺胆酸共转运多肽（NTCP）和有机阴离子转运体（OATP）[6]。被重吸收的胆汁酸经肝细胞加工转化后，再由位于胆管侧膜的外排转运体胆盐输出泵（BSEP）和多药耐药相关蛋白（MRP2）排泄进入胆汁，在机体进食后胆汁又被分泌入小肠进行脂质的吸收消化[7]。胆汁酸代谢酶主要有Ⅰ相代谢酶细胞色素P450 3A4酶（CYP3A4）和细胞色素P450 2B10酶（CYP2B10），Ⅱ相代谢酶UDP-葡萄糖醛酸转移酶（UGT）和胞浆磺基转移酶( SULT)。通过这些酶的代谢作用，疏水性胆汁酸与不同的基团结合，增加了亲水性，毒性降低，易于从胆汁、尿、粪便中排出[8,9]。
导致胆汁淤积的常见病因有脓毒症性胆汁淤积，药物性胆汁淤积，酒精性肝病，妊娠期胆汁淤积等。脓毒症胆汁淤积是脓毒症性肝损伤的常见临床表现形式，感染引起的过度炎症会诱发肝脏免疫细胞释放炎性细胞因子，这些炎症因子会引起胆汁酸的转运体的表达失调，导致胆汁酸在肝内过度蓄积，诱发胆汁淤积[10]。药物性胆汁淤积主要是由于许多胆汁酸转运体也可以转运药品和其代谢物，某些药物与可以干扰或抑制它们的活性，例如抗感染药，抗糖尿病药，抗炎药，精神药物和心血管药物等，其症状通常在停药后可得到改善[11]。酒精性肝病在酗酒者中常见，酒精会引起肝脏代谢变化，增加氧化应激并改变脂质代谢，具有肝毒性，长期饮酒会改变胆汁酸合成酶和代谢酶的表达，导致胆汁淤积[12]。部分妊娠期妇女在妊娠早期或中期也会发生胆汁淤积，这主要与遗传因素、激素水平、环境因素有关，最终结果是改变胆汁酸转运体的表达，影响胆汁酸的外排，妊娠性胆汁淤积多数在分娩后会迅速恢复，但严重者也可导致早产，羊水污染，胎儿窘迫和死产[13]。
为了研究胆汁淤积发生机制和测试药物抗胆汁淤积的疗效和药理机制，能准确模拟人类胆汁淤积性肝损伤的动物模型是十分必要的。通常采用啮齿动物造模，它们体积小，寿命短，易于饲养和繁殖，此外，小鼠和人类之间有显著的遗传相似性，再加上遗传基因诱捕的可能性和便利性，为研究特定基因信号传导途径和确定潜在治疗靶点提供了可能性[14]。第一个被广泛实用的模型是啮齿动物胆管结扎术，主要用于研究肝外胆汁淤积，但是简单的胆道梗阻模型不能重现导致胆汁淤积性胆汁淤积的复杂机制[15]。在最近几年的实验研究中，最常用的是化学诱导法造模，可以很好的模拟肝内胆汁淤积的生理生化特征，易于探究发病机制和药物研发，例如用内毒素诱导，乙炔雌二醇诱导，ANIT诱导和利福平诱导的胆汁淤积动物模型，它们被广泛地用于感染、妊娠期、胆管损伤、药物诱导的胆汁淤积的研究[2,14]。
胆汁淤积的病情发展过程中，如果得不到及时改善，很可能会发展成危及生命的肝纤维化甚至是肝衰竭，然而针对胆汁淤积的治疗手段有限，临床治疗药物匮乏，获FDA 批准上市的药物只有熊去氧胆酸（ursodeoxycholic acid，UDCA）和奥贝胆酸（OCA）两种药物。UDCA疗效局限于原发性硬化性胆管炎，副作用较大，且对部分患者无效，OCA是近几年批准上市的以核受体为靶点的新药，但价格昂贵。目前对抗胆汁淤积药物的研发主要集中于通过激活核受体来调节胆汁酸转运体和代谢酶的表达，人工合成的核受体配合物也确实有改善胆汁淤积的功效，但大多药代动力学参数差，结构仍需改善[16]。在我国中草药中也发现了许多有抗胆汁淤积药效的药物，它们大多也有核受体激动剂的活性[17]，例如大黄素、茵栀黄、丹参酮ⅡA等，均有调节胆汁酸代谢和保护肝脏的作用，且副作用小，疗效较理想。
本课题对胆汁淤积性肝损伤的药理研究进展进行综述，以胆汁酸合成、代谢、转运等环节中的关键酶和转运体为切入点，总结和讨论胆汁淤积的发生机制、造模方法及药物研究进展，为治疗胆汁淤积药物的研发提供思路。
参考文献：
［1］兰贺燕, 汤湧, 阎姝. 靶向FXR治疗胆汁淤积性肝病的研究进展[J]. 中国新药杂志, 2018;27:2775-2780.
［2］Rodriguez-Garay EA. Cholestasis: human disease and experimental animal models[J]. Annals of hepatology, 2003;2:150-158.
