1、课题解决的问题
细胞毒性药物已广泛应用于癌症的化疗,而这些药物对癌细胞和人体的健康细胞的非特异性,使它在杀伤癌细胞的同时,也产生了全身严重的毒副作用。而且,多数化疗药物都存在明显的疗效- 剂量依赖关系,即加大药物剂量能明显提高疗效,但增加化疗药物的剂量,势必增加全身的毒性反应,使化疗药物的临床应用受到很大的限制。因此,提高局部的药物浓度,减少全身的毒性反应一直是人们研究的热门课题，而纳米粒载药系统更是成为研究者们研究的热点。本课题采用PEG化氧化壳聚糖为载药系统，不仅可以提高局部药物浓度还可以降低胃肠道的消化作用影响。壳聚糖因其具有良好的生物学特性而成为多种药物载体研究的热点。药物经过壳聚糖负载后，不仅能够达到缓释控释的目的，还能够改变药物的给药方式，以此减少给药次数，降低药物不良反应，提高药物生物利用度。到目前为止,pH响应载体主要通过两种策略构建:可酸解的化学键(如腙键、原酸酯和缩醛等)和聚电解质(如聚组氨酸和聚丙烯酸等)。Prabahara 等将阿霉素（DOX)通过腙键连接到多臂双亲嵌段共聚物上,制备了具有pH 响应性的肿瘤靶向载药体系。在弱酸性介质(pH= 6. 6)中,DOX可快速释放;而在pH= 7.4介质中,DOX很少释放。Xue等通过开环聚合制备的两亲性聚丙烯酸-聚乳酸嵌段共聚物(PAA c-b-PDLLA),也具有一定的pH响应性。
2、课题研究步骤
本课题研究手段分以下几个大方向着手：
（1）壳聚糖的氧化：取2.5g壳聚糖加入100ml pH4.5的HAc-NaAc溶液，室温下搅拌壳聚糖至大部分溶解，再加入5.15gKIO4，继续搅拌24h后抽滤，得下层滤清液。在滤清液中加入10ml乙二醇，室温下搅拌1h，放在-25℃环境下冻干2h后，放入冷冻干燥机中冻干。冻干后用3500的透析袋进行透析。从而得到氧化壳聚糖，将制备温度控制在20℃、40℃以及60℃，可以得到不同氧化度的氧化壳聚糖。
（2）氧化壳聚糖的氧化度测定：取50mg氧化壳聚糖，加入12.5ml 0.25M盐酸羟胺-甲基橙溶液，搅拌2h后滴加0.1M的NaOH溶液标定测定其氧化度，记录实验操作时其颜色变化点的体积与pH变化值。而pH也要一直记录到pH=5为止。
（3）PEG化氧化壳聚糖：取氧化壳聚糖加入NaHCO3缓冲液搅拌直到固体大部分溶解后，再次加入相应量的PEG-5000反应，反应6h后用3500的透析袋透析后在-25℃下冻干，即可得到PEG化氧化壳聚糖。
（4）嫁接阿霉素得纳米粒：目前纳米粒的制备方法主要有3大类，分为机械粉碎法、物理分散法、化学合成法。机械粉碎法是利用机械将物质粉碎成纳米级的粒子。除改进传统的机械粉碎设备，还开发了新机械粉碎技术，如高压均质法-气穴爆破法、超临界流体-液膜超声技术等。物理分散法常用的有：双乳化剂蒸发法、乳化-溶剂挥发法、溶剂扩散法、高压乳匀法、逆向蒸发法、熔融分散法和溶剂蒸发法等。化学合成法分为乳化聚合法和微乳液法。乳化聚合法是一种经典的、常用的高分子合成方法，系将两种互不相溶的溶剂在表面活性剂的作用下形成微乳液，在微乳滴中单体经成核、聚结、团聚、热处理后得纳米粒子。影响纳米粒子大小的因素包括pH、乳化剂和稳定剂种类及用量、单体浓度等。微乳液法指两种互不相溶的溶剂在表面活性剂的作用下形成乳液，在微泡中经成核、聚结、团聚、热处理后得到纳米粒子。常用的油-水体系有：柴油/水，煤油/水、汽油/水、甲苯的醇溶液/水等。本课题运用化学合成法形成嫁接阿霉素的纳米粒。并测出其纳米粒径及其载药量。
（5）纳米粒pH响应敏感性：将制备合成的纳米粒置于不同的pH环境下进行实验，从而得到最敏感的pH范围值。
