胰腺成体干细胞能量代谢产能途径的初步研究课题性质 radic;基础研究应用课题 设计型 调研综述 理论研究1. 研究意义糖尿病是一组由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损,或两者兼有引起高血糖为特征的代谢性疾病。
目前可通过药物治疗控制糖尿病和胰岛细胞移植治愈1型和部分2型糖尿病。
大量研究表明,胰腺成体干细胞的移植能够用于Ⅰ型糖尿病患者的治疗,甚至达到停用胰岛素的目的。
胰腺成体干细胞是存在于胰腺组织、能自我更新、具有多分化潜能的发育早期细胞,其具有潜在分化能力,其分化特点是在特定的条件下分化为胰腺终末细胞。
因此,胰腺成体干细胞代谢应该有独特于普通细胞的特点。
研究胰腺成体干细胞的代谢特点、胰腺成体干细胞与普通细胞的代谢区别,对于胰腺干细胞的分离鉴定、体外诱导分化、干细胞的增殖培养都有重要作用。
2.拟研究的问题 胰腺成体干细胞与胰腺普通细胞之间ATP产能途径的差异3.拟采取的研究方案国际公认CD133为胰腺成体干细胞的表面标志,本实验首先将胰腺消化成单细胞悬液,然后通过流式分选将CD133 细胞与CD133-细胞分离,通过Qpcr比较CD133 细胞与CD133-细胞的糖代谢酶以及通过ATP试剂盒检测糖酵解和氧化磷酸化的抑制剂干扰两种细胞后ATP的产量来比较CD133 细胞与CD133-细胞产能途径的区别。
部分基本操作具体方法:(一) 胰腺单细胞悬液的制备1. 取干净托盘,铺入碎冰,将三个玻璃皿至于其上,其中一个倒入PBS适量2. 将小鼠脱颈处死,75%乙醇中浸泡三分钟。
剖开小鼠左腹,将胰腺钝性分离后取出。
3. 取出胰腺在PBS中荡洗。
剩余内容已隐藏,您需要先支付 10元 才能查看该篇文章全部内容!立即支付
